C型肝炎ウイルスの特異的細胞障害性T細胞により認識される抗原エピト-プの解析

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03152025
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 井廻 道夫 東京大学, 医学部(病), 助教授 (70134228)
• キーワード: C型肝炎 / 細胞障害性T細胞 / 抗原エピト-プ

研究概要

C型肝炎ウイルス(HCV)の特異的細胞障害性T細胞により認識される抗原エピト-プの解析を行うため、C型肝炎患者血清中よりC型肝炎ウイルスのコア抗原部分をコ-ドするcDNAをクロ-ニングした.
また、コア抗原全長をカバ-し、オ-バ-ラップする20アミノ酸のペプチドも合成した。HCVコア蛋白質をコ-ドするcDNAを組み込んだEBウイルス(EBV)シャトルベクタ-も作製した。HCVコア蛋白をコ-ドするcDNAを用いて、コア抗原全長を含む蛋白も作製中である。更に、抗原提示細胞として用いるため患者末梢血リンパ球よりEBVによりトランスフォ-ムさせたB細胞株も樹立した。C型肝炎特異的細胞障害性T細胞としては、慢性C型肝炎患者末梢血リンパ球よりレクチン刺激と限界希釈法によりC型肝炎患者肝細胞特異的細胞障害性T細胞株TAーNBー2を樹立すると同時に、同じ患者の末梢血リンパ球よりペプチド刺激及びHCVコア蛋白をコ-ドするcDNAを組み込んだEBVシャトルベクタ-をトランスフェクトした患者B細胞株による刺激で、C型肝炎特異的細胞障害性T細胞をライン化しつつある。更に5人の慢性C型肝炎患者肝組織浸潤リンパ球より、レクチン刺激により細胞障害性T細胞株31株とヘルパ-T細胞株35株を樹立すると同時に、抗原提示細胞として用いるため各患者末梢血リンパ球よりEBVによりトランスフォ-ムさせたB細胞株も樹立した。現在、HCVコア蛋白質をコ-ドするcDNAを組み込んだEBVシャトルベクタ-をトランスフェクトしたB細胞株あるいは合成ペプチドをコ-ドしたB細胞株を標的細胞として用い、C型肝炎ウイルス抗原特異性とC型肝炎ウイルス抗原特異的細胞障害性T細胞の抗原エピト-プの検討を行っている。

研究成果

• [文献書誌] Michio Imawari,et al.: "Viral hepatitis C,D,and E,ed by Shikata T,Purcell RH and Uchida T,pp 69-74.Cytotoxicity of a non-A,non-B hepatitis-specific T-cell clone on hepatocytes from patients with various liver diseases and interferon a-treated hepatocytes from patients with chronic non-A,non-B hepatitis." Elsevier science Publishiers B.V., (1991)