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リンパ網内系の悪性腫瘍の好発を特徴とするヒト劣性遺伝病のアタキシア・テランジェクタシア(AT)の原因遺伝子の単離を目的とし、AT遺伝子の染色体マッピングとAT遺伝子座近傍からのDNAの分離を試み、以下の成果が得られた
1.AT患者由来の永代細胞株AT2KYSVを受容細胞とし、ヒト第11番染色体あるいは種々のX/11転座染色体をもつマウス細胞株を供与細胞とする染色体移入とAT細胞の放射線高感受性を指標とした解析から、AT遺伝子座位を11q23領域に同定した。
2.染色体移入実験の過程で、AT座位を消失すると同時に11q23領域に微小欠失をもつヒト細胞クロ-ン2859/4ー1を得た。2859/4ー1からマウスA9細胞への微小核融合を行ない、欠失X/11転座染色体を単一に保有する1クロ-ンA9(A9(2859/4ー1)ー2)ー1を得た。
3.マウス細胞内でのヒト染色体のDNAを調べるためAluーPCRによる解析を行なった。Aluプライマ-TC65を用い、第11番染色体、X染色体、X/11転座染色体を保有するA9細胞、今回作成したA9(A9(2859/4ー1)ー2)ー1、および親株A9細胞のDNA間で比較したところ、DNA増幅はヒト染色体に特異的であり、各染色体に特有のPCR産物が認められた。さらにPCR産物相互でのサザン解析からA9(A9(2859/4ー1)ー2)ー1で特異的に消失しているPCR産物がいくつか確認された。これらマ-カ-を手がかりにAT遺伝子座近傍をさらに詳細に解析中である。
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