特定染色体導入によるがん抑制遺伝子の同定

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03152087
• 研究機関: 鳥取大学
• 研究代表者: 押村 光雄 鳥取大学, 医学部, 教授 (20111619)
• 研究分担者: 久郷 裕之 鳥取大学, 医学部, 助手 (40225131) ; 清水 素行 鳥取大学, 医学部, 助教授 (80130756)
• キーワード: がん抑制遺伝子 / 染色体導入 / 膀胱がん / 細胞老化 / 11番染色体 / 3番染色体 / 腎細胞がん / DT細胞

研究概要

ヒト膀胱がんのがん抑制染色体の同定を目的としてpSV2neo遺伝子で標識した正常ヒト線維芽細胞由来の7,9,11,12番染色体を微小核融合法によりヒト膀胱がん細胞株H-15細胞に移入した。11番染色体移入クロ-ンでは,5回の移入実験によって得られた20クロ-ンにおいては,細胞形態の顕著は変化(Flat)が認められ,そのうち15クロ-ンは早期の段階で老死化した。残る5クロ-ンは,Flatな細胞と親細胞と同様な形態を示す細胞とが混在していた。また,7,9,12番染色体導入クロ-ンの細胞形態は親細胞と同様の形態と増殖速度を示し,クロ-ニング後も老死化することはなかった。現在までに,細胞老死化にかかわる遺伝子はヒト1番および4番染色体に存在することを示す報告がなされているが,上述の結果は,細胞老化にかかわる遺伝子がヒト11番染色体上にも存在することを示す。
放射線照射により断片化したヒト3番染色体をヒト腎細胞がん細胞株RCC23に導入した。その結果,D3S22〜H3S30領域(3p25)およびD3F15S2〜D3S30領域(3p21)を含む染色体を導入した場合において,細胞形態の変化ならびに細胞増殖速度の低下が認められ,これらの領域にRCC23細胞の腫瘍形質抑制にかかわる遺伝子(群)の存在が示された。この領域は,ヒト腎細胞がんにみられる特異的染色体欠失領域であった。
Kirsten肉腫ウイルス形質転換NIH3T3(DT)細胞の増殖抑制にかかわる遺伝子は1qcenー1q25に存在することが示されているが,RTーAluーPCR法により,この領域に存在し,発現されているDNA断片を2クロ-ン得た。このクロ-ンをプロ-ブとして,コスミッドクロ-ンのスクリ-ニングを行う予定である。

研究成果

• [文献書誌] Tnaka,K.: "Suppression of tumorigenicity in human calon carcinoma cells by introduction of normal chromosome 5 of 18" Nature. 349. 340-342 (1991)
• [文献書誌] Hoshino,Y.: "Normal human chromosome 5,on which a familial adenomatous palyposis gene is lacated,has tumon suppressive activity" Biophysical Res.Commun.174. 298-304 (1991)
• [文献書誌] 堀川 泉: "癌抑制遺伝子ー研究の現状と展望ー" 癌と化学療法. 18. 153-159 (1991)
• [文献書誌] Satoh,H.: "Introduction of new genetic markers on human chromosomes" Experimental Cell Res.193. 5-11 (1991)
• [文献書誌] Yamakawa,K: "Isolation and mapping of 75 new DNA markers on human chromosome 3" Genomics. 9. 536-543 (1991)
• [文献書誌] 田中 憲穂: "ヒ素化合物による遺伝子増幅の誘導" 組織培養. 17. 42-46 (1991)
• [文献書誌] 久郷 裕之: "単一染色体移入によるがん抑制遺伝子の解析" 血液腫瘍科学. 22. 425-430 (1991)
• [文献書誌] 押村 光雄: "染色体移入による癌抑制遺伝子に関する研究" 代謝. 28. 203-211 (1991)
• [文献書誌] Oshimura,M.: "Lessons learned from studies on tumor suppression by microcell-mediated chromosome transfer" Environmental Health Perspectives. 93. 57-58 (1991)
• [文献書誌] Hiratsuka,M.: "Cytostatic effect of deoxyspergualin on a murine leukemia cell line L1210" Japan J.Cancer Res.82. 1065-1068 (1991)
• [文献書誌] 清水 素行: "微小核細胞融合法を用いた染色体導入と単一染色体パネル作製への応用" 蛋白質,核酸・酵素. 36. 2226-2230 (1991)
• [文献書誌] Ejima,Y.: "Determination of the chromosomal site for the human radiosensitive ataxia telangiectasia gene by chromosome transfer" Mutation Res.250. 337-343 (1991)
• [文献書誌] 中川 ゆづき: "染色体ライブラリ-" 組織培養. 17. 473-477 (1991)
• [文献書誌] Funaki,K.: "Hereditary renal cell Carcinoma in the rat associated with nonrandom loss of chromosomes 5 and 6" Cancer Res.51. 4415-4422 (1991)
• [文献書誌] 堀川 泉: "癌抑制遺伝子への細胞工学的アプロ-チ" 日本大腸肛門病学会誌. 44. 1214-1219 (1991)
• [文献書誌] 押村 光雄: "微小核融合法による染色体移入" 内分泌の進歩. 9. 125-131 (1991)
• [文献書誌] Seya,T: "Human complemert regulatory proteins expressed on mouse Aq cells containing a human chromosome 1" Immunology. 74. 719-724 (1991)
• [文献書誌] Hosoya,M: "Structure of the human pituitary aderylate cyclase activating polypeptide(PACAP)gene" Biochem.Biophys.Acta. 1129. 199-206 (1992)
• [文献書誌] 押村 光雄: "染色体導入による癌抑制遺伝子の検索" 最新医学. 47. 411-418 (1992)
• [文献書誌] Iizuka,M.: "Cloning and polymerase chain reaction-single-strand conformation polymorphism analysis of anonymous alu repeats on chromosone 11" Genemics.
• [文献書誌] Saito,S.: "Isolation and mapping of 68 RFLP markers on human cheomosome 6" Am,J,Human Genet.
• [文献書誌] Parshad,R.: "Complementation of a DNA repair deficiency in six human tumor cell linis by chromosome 11" Human Genet.
• [文献書誌] Ichikawa,T.: "Localization of metastasis suppressor gene(s) for prostatic cancer to the short arm of human chromosome 11" Cancer Res.
• [文献書誌] Emi,M.: "Isolation and mapping of 88 new RFLP markers on human chromosome 8" Genomics.