甲状腺刺激ホルモン産生細胞欠損トランスジェニックマウスの作成

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03206201
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 笠井 憲雪 北海道大学, 医学部, 助教授 (60001947)
• 研究分担者: 三好 一郎 北海道大学, 医学部, 助手 (10183972)
• キーワード: 甲状腺刺激ホルモン(TSH) / トランスジェニックマウス / SV40 large T抗原 / ジフテリア毒素A鎖 / TSHβ鎖発現制御領域 / 脳下垂体前葉 / 受精卵 / 卵巣移植

研究概要

甲状腺刺激ホルモン(TSH)産生細胞に特異的な発癌モデルトランスジェニックマウス及びこの産生細胞を欠損するトランスジェニックマウスの作成を試みた。まず前者はヒトTSHβ鎖エクソンの上流1kbpおよび5kbpにSV40largeT抗原のDNA断片を融合した。それぞれPTTPー1(8kbp)およびPTTPー5(12KbP)の遺伝子を用い受精卵に注入した。そしてそれぞれ10匹および7匹のFounderマウスが得られ、解析を行った。このうちPTTPー5導入の2匹は生後約半年で前頭部から頭頂部にかけて顕著な膨隆がみられた。剖検では下垂体の肥大がみられ、成長ホルモンおよびプロクラチン陽性細胞が多数みられた。TSH陽性細胞は肥大部全体に観察され、抗SVTモノクロ-ナル抗体によって肥大部に多数の陽性細胞が観察された。現在このマウスを卵巣移植により子孫を残し、系統化中である。
一方産生細胞欠損マウス作製にはヒトTSHβ鎖発現制御領域にジフテリア毒素A鎖(DTA)DNA断片から成る融合遺伝子を受精卵に注入した。これはジフテリア毒素が発現されたTSH産生細胞が細胞内蛋白合成を阻害されることにより細胞孔に至るものである。32匹産仔のうち6匹に注入遺伝子が導入されていることが確認された。そのうちの一匹に劇的な下垂体前葉の萎縮および細胞数の減少が認められた。現在このマウスの子孫を作り、系統化を進め、さらに詳しい解析を行っている。

研究成果

• [文献書誌] Kato,K.: "Evaluation of Serum Used in Mouse Splenic Cell Culture for Interferon Production by Staphylococcal Entrotoxin A." Immunol.Infect.Diseases. 1. 95-98 (1991)
• [文献書誌] Nagayama,S.: "Occurrence of autoimmune Antibodies to Liver Microsomal Proteins in Association with Fulminant Hepatitis in the LEC Strain of Rats." Biochem.Biophys.Res.Comm.179. 1134-1140 (1991)
• [文献書誌] Okayasu,T.: "Inherited copper toxicity in LEC rats exhibiting spontaneouse hepatitis; A model of Wilson's disease." Pediatric Res.,. (1992)
• [文献書誌] Miyoshi,I.: "Usefulshort‐range transport of mouse embryos by means of a nonfreezing techique." Lab.Anim.Sci.,. (1992)
• [文献書誌] Yamashita,T.: "Unidirectional distribution of Mosaicism in Chimera Rats." Lab.Anim.Sci.(1992)
• [文献書誌] Miyoshi,I.: "A practical transport system for mouse embryos cryopreserved by simple vitrification." Lab.ANim.Sci.,. (1992)