HIV表面糖蛋白質の糖鎖とその感染過程における役割

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03219217
• 研究機関: 藤田保健衛生大学
• 研究代表者: 水落 次男 藤田保健衛生大学, 医学部, 助教授 (90133149)
• 研究分担者: 浜子 二治 藤田保健衛生大学, 短期大学, 助手 (80180933)
• キーワード: エイズ / HIV / 糖鎖異常 / 糖鎖構造 / IgG / HTLVーIIIB / LAVー1

研究概要

1.HIV糖蛋白質糖鎖の構造解析:HTLVーIIIBおよびLAVー1をMOLTー4細胞にそれぞれ感染させると、そこで増殖したHIVは感染能を同じにするとHTLVーIIIBでは合胞体形成能がLAVー1に較べて約40%まで低下していることが示されてたので、同じMOLTー4細胞の糖鎖生合成装置を利用している両ウイルスの糖蛋白質糖鎖を解析し、合胞体形成能と糖鎖の関係を検討した。まず、両ウイルス感染細胞をトリチウム標識したマンノ-ス、ガラクト-ス、Nーアセチルグルコサミンを加えて培養した後、細胞画分、ウイルス画分、培養液画分に分け、各画分よりエイズ患者血清とプロテインAアガロ-スを用いてトリチウム標識ウイルス糖蛋白質を調製した。次に、各糖蛋白質画分のトリチウム標識糖鎖をヒドラジン分解法を用い調製し、高圧濾紙電気泳動、BioーGel Pー4HPLCなどにかけてその糖鎖パタ-ンを比較検討した。その結果、両ウイルス間で糖蛋白質の糖鎖パタ-ンの違いが各画分で共通して存在することが示された。
2.HIV感染者における血清IgGの糖鎖構造異常:まず、健常人2例およびHIV感染者[CDC第II期(3例)、CDC第IV期(3例)]の血液より調製したIgGからヒドラジン分解法を用いて糖鎖を調製した。次に、我々が開発した一連の微量糖鎖構造解析技術を駆使してそれらの糖鎖構造を解析した。その結果、健常人と比較してHIVキャリヤ-(CDCII期)、エイズ患者(CDCIV期)のIgGでは、ガラクト-スやシアル酸を含有する糖鎖が顕著に増加しており、また、フコ-ス含有糖鎖が半減していることが明らかとなった。今後は、検体数をさらに増やしてこの現象を確認するとともに、HIV感染者の診断への応用の可能性やエイズの病態との関係も調べてみる必要があろう。

研究成果

• [文献書誌] Tsuguo Mizuochi: "Preparation of oligosaccharida probes(neoglycolipids)and their application to elucidation of functional role of carbohydrate meiety of glycoproteins." Trens in Glycosci.and Glycotech.3. 435-437 (1991)
• [文献書誌] Taei Matsui: "βーSubunits of eguine chorionic gorndotropin and lutenizing hormone with an idetical amino acid Aeguence have different asparazineーlinked oligosaccharide chains." Biochem.Biophys.Res.Commun.174. 940-945 (1991)
• [文献書誌] Masaya Ohta: "Structures of asparagineーlinked oligosaccharides from hen eggyalk antibody(IgY):Occurrence of unusual glucosylated oligomannose type oligosuccharides in a mature glycoprotein." Glycconjugate J.8. 400-413 (1991)
• [文献書誌] Taei Matsui: "Carbohydrate analysis of human von Willebrand factor with horseradish peroxidaseーconjugated lectins." Biochem.Biophys.Res.Commun.178. 1253-1259 (1991)
• [文献書誌] Taei Matsui: "Structures of the asparagineーlinked oligosaccharide chains of human von Willebrand factor:occarrence of blood group A,B,and H(O)stucctures" J.Biol.Chem.267. (1992)
• [文献書誌] 水落 次男: "糖蛋白質糖鎖由来オリゴ糖プロ-ブライズラリ-を用いた尿路感染症患者由来大腸菌の糖鎖特異的付着性の検討" Bacterial Adherence研究. 4. 36-43 (1991)
• [文献書誌] 水落 次男: "HIV表面糖蛋白質糖鎖の役割" 実験医学増刊「ウイルス-レセプタ-からウイルス病まで」. 9. 80-87 (1991)
• [文献書誌] 水落 次男: "エイズウイルス感染と糖鎖" 蛋白質核酸素. (1992)
• [文献書誌] 水落 次男: "糖鎖生物学とHIV" MEDICAL Immunology. (1992)
• [文献書誌] 水落 次男: "エイズウイルス表面糖鎖の化学構造と感染機序" 日本臨床. (1992)
• [文献書誌] Tsuguo Mizuochi: "Methods in Molecular Biology" Humana Press, (1992)
• [文献書誌] 水落 次男: "糖鎖工学ーこれからの生命科学「糖鎖の脂質化工学」" 産業調査会事伝出版センタ-, (1992)
• [文献書誌] 水落 次男: "生物薬科学実験講座「ネオグリコリピドの合成」" 広川書店, (1992)
• [文献書誌] 水落 次男: "最近のエイズ研究「エイズウイルスのエンベロ-プ糖蛋白質gp120の糖鎖構造とその生理的意義」" オンコロジア社, 73-78 (1991)