| 研究課題/領域番号 |
03225201
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
石俊 輝雄 北海道大学, 医学部, 教授 (60001872)
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| 研究分担者 |
田代 邦雄 北海道大学, 医学部, 教授 (90002154)
荒磯 恒久 北海道大学, 応用電気研究所, 助教授 (30151145)
西平 順 北海道大学, 医学部, 助手 (30189302)
高桑 雄一 東京女子医科大学, 教授 (40113740)
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| キーワード | 時間分解顕微蛍光法 / ピコ秒パルスレ-ザ- / ヘキサゴナル相 / ジアシルグリセロ-ル / リポソ-ム / 蛍光寿命 |
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| 研究概要 |
本研究はジアシルグリセロ-ル(DG)が、膜融合にどの様に関与するかを明らかにする目的で、時間分解顕微蛍光法を用いて以下の実験を行った。リポソ-ムはホスファチジルコリン(PC):ホスファチジルエタノ-ルアミン(PE):コレステロ-ル=1:1:1(mol/mol)で構成されるmulti lamellar vesicle(MLV)を用いた。先ず、蛍光リン脂質のNBDーPEを含むMLVの蛍光強度の温度変化を検討すると、脂質二重層からヘキサゴナル相への移行は、2.5mol%ジオレオイルグリセロ-ル(DOG)を含むMLVで約30℃から見られ、DOGの濃度依存性に移行温度の低下と移行速の上昇が認められた。
次に、蛍光プロ-ブDPHを側鎖の一つに持つPC(DPHーPC)、あるいはDPHーPCをホスホリパ-ゼCで水解して調製したDPHーDGを含んだMLV内のDPHの分子運動をピコ秒パルスレ-ザ-を用いて解析した。2.5mol%のDOGを含んだMLV内のDPHの運動速度とその範囲は、同一温度下では常にDPHーDGの方がDPHーPCより大きく、また温度によるその増大率もDPHーDGの方がDPHーPCより大きかった。一方。37℃におけるDOG存在下でのDPHの運動性の変化は、DPHーDGでは5mol%以上で、DPHーPCでは 10mol%以上で認められた。また、DPHーDGではDOGの濃度に依存して蛍光寿が短縮したが、DPHーPCではその様な現象は見られなかった。
以上の結果より、生体膜における脂質二重層からヘキサゴナル相への移行が小量のDGにより誘導されることが示唆された。
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