腫瘍マ-カ-としてのMnース-パ-オキサイドディスムタ-ゼの癌化による発現機構

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03258224
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 谷口 直之 大阪大学, 医学部, 教授 (90002188)
• 研究分担者: 藤井 順逸 大阪大学, 医学部, 助手 (00222258) ; 鈴木 敬一郎 大阪大学, 医学部, 助手 (70221322)
• キーワード: MnーSOD / 上皮性卵巣癌 / TNF / ILー1 / カルボ-ルエステル / プロテインキナ-ゼーC

研究概要

活性酸素は生体内で蛋白質や脂質の過酸化反応やDNAの損傷を起こして発癌に至らせると考えられる。また、我々が既に報告してきたように、このMnーSODは上皮性卵巣癌の良い腫瘍マ-カ-となる。今回は、ヒト及びラットMnーSODに特異な抗体を作製し、これを用いて血清中及び組織中のMnーSODを定量した。その結果、ムチン性嚢胞腺癌に比して、しょう液性腺癌組織ではMnーSODの増加が認められた。次に、卵巣癌のモデル動物としてラットの卵巣に発癌物質により卵巣腫瘍を形成させ、この腫瘍細胞におけるMnーSODの発現を調べた。その結果、癌細胞ではMnーSOD蛋白質及びmRNAの発現が増加していた。またTNFやILー1といったサイトカインがMnーSODの誘導を起こすことが知られている。そこでHeLa細胞を様々な薬物で刺激した結果、TNF,ILー1に加えホルボ-ルエステル(TPA)もまたMnーSODの発現を誘導することが明らかとなった。これらの刺激による誘導はTNF耐性細胞においてのみ見られた。次にTPAで前処理することによってプロテインキナ-ゼーC(PKーC)がダウンレギュレ-トされた細胞に対してTNFの効果を調べた。TNFはこの様な細胞においても強い誘導効果を示し、処理していない細胞に対して約2倍の増強が認められた。従ってTNFはRKーCを介しない別の経路を活性化すること、その際にTPA処理の間に合成される蛋白質因子が関与することが示唆された。MnーSOD遺伝子の発現がどのように調節されているのか、より明確にする為にはMnーSOD遺伝子そのものの解析と結合蛋白質について検討が必要である。我々は既にヒトMnーSOD遺伝子をクロ-ン化し5'調節部位について塩基配列を決定した。現在この得られたクロ-ンについてプロモ-タ-領域の解析を進めている。

研究成果

• [文献書誌] Deutsch,H.F.: "Preparation of human manganese superoxide dismutase by TriーPhase partitioning and preliminary crystallographic data." J.Mol.Biol.219. 103-108 (1991)
• [文献書誌] Kobayashi,T.: "Superoxide dismutase in psoriasis,squamous cell carcinoma and basal cell epithelioma:an immunohistochemical study." British J.Dermatology. 124. 555-559 (1991)
• [文献書誌] Fujii,J.: "Phorbol ester induces manganeseーsuperoxide dismutase in tumor necrosis factorーresistant cells." J.Biol.Chem.266. 23142-23146 (1991)
• [文献書誌] Kawamura,N.: "High levels of Mnーsuperoxide dismutase in serum of patients with neuroblstoma and in human neuroblastoma cell lines." Free Rad.Biol.Med.12. (1992)
• [文献書誌] Taniguchi,N.: "Clinical significances of superoxide dismutase:Changes in aging,diabetes,ischemia and cancer." Advance in Clinical Chemistry. 29. (1992)
• [文献書誌] Ono,M.: "Elevated level of serum Mnーsuperoxide dismutase in patients with primary biliary cirrhosisーinvolvement of free radicals in the pathogenesis in primary biliary cirrhosis." J.Lab.Clin.Med.118. 476-483 (1991)