1994 年度実績報告書

球状ウイルスの高分解能X線結晶構造解析

研究課題

研究課題/領域番号	03403025
研究機関	徳島大学
研究代表者	月原冨武徳島大学, 工学部, 教授 (00032277)
キーワード	球状ウイルス / 結晶構造 / X線解析 / 立体構造 / 形態形成 / タバコネクロシスウイルス / イネ萎縮病ウイルス
研究概要	タバコネクロシスウイルス(TNV)はT=3の正二十面体対称を持ち、180個のタンパク質サブユニットと1本のRNAで構成されている。X線回折強度データは高エネルギー研究所放射光実験施設の巨大分子用ワイセンベルグカメラを用いて収集した。結晶は立方晶系、空間群はP4_22、格子定数はa=338Åである。単方格子中に2個のウイルス粒子が含まれており、非対称単位中には15分子のサブユニットが含まれている。8Å分解能で分子置換法によって初期位相を決定し、非結晶学的対称による平均(NCSA)法によって精密化及び位相の拡張を行い5Å分解能の解析を完結した。R値は0.17,相関係数は0.92になった。5Å分解能の電子密度図に基づいて正二十面体対称の非対称単位にある3サブユニットの分子モデルを作成することが出来た。TNVと同じくT=3ウイルスである Souther Bean Mosaic Virus(SBMV)との比較をすると、殻タンパク質の3個所でアミノ酸残基の欠損が有ることがわかった。またウイルス殻タンパク質のRNAと相互作用する領域には特異的に核酸と相互作用するとされているアミノ酸が集まっている。この特異的なタンパク質と核酸の相互作用するとされているアミノ酸が集まっている。この特異的なタンパク質と核酸の総合作用がTNVの形態形成において重要な役割を果しているものと思われる。これらの結果は Acta Cryst.の論文として報告した。 RDV分子量は約6500万であり、結晶化に成功した最大の粒子である。結晶は立方晶系、空間群はI23,格子定数はa=789Åである。TNVと同様に放射光を用いて回折実験を行った。回折強度データ処理にも成功して、20Å分解能ので二重殻構造を決定した。

研究成果
(11件)

すべてその他

すべて文献書誌 (11件)

[文献書誌] H.Mizuno et al: "Crystallization and Preliminary X-ray Study of a Double-Shelled Sphevical Virus,Rice Dwarf Virus." J.Mol.Biol.219. 665-669 (1991)
[文献書誌] S.Yoshikawa et al: "Strategies for Crystallization of Large Membrane Protein Complexes." J.Crystal Growth. 122. 298-302 (1992)
[文献書誌] K.Shinzawa-Itoh et al: "Single Crystals of Bovine Heart Cytochrome c Oxidase at Fully Reduced States are Isomorphous with Each Other." J.Mol.Biol.228. 987-990 (1992)
[文献書誌] 福山恵一,月原冨武: "ウイルスの立体構造." バイオサイエンスと工業. 50. 27-32 (1992)
[文献書誌] H.Mizuno et al: "Crystallization and PreliminaryX-ray Studies of Wild Type and Catalytic-site Mutant Amylase from Bacillus subtilis." J.Mol.Biol.234. 1282-1283 (1993)
[文献書誌] 月原冨武,福山恵一: "分子置換法による球状ウイルスのX線結晶構造解析." 放射光. 6. 37-48 (1993)
[文献書誌] 月原冨武他: "超分子複合体のX線結晶構造解析." 蛋白質・核酸・酵素. 38. 1247-1253 (1993)
[文献書誌] 月原冨武: "超分子複合体の構造解析." 生物物理. 33. 24-29 (1993)
[文献書誌] S.Ikemizu et al: "Crystal Structural Aanlysis of[2Fe-2S]Ferredoxin I from Equistum Arvense at 1.8Å Resolution." Acta Crystallgr.D50. 167-174 (1994)
[文献書誌] M.Bando et al: "Crystal Structure Analysis of Tobacco Nerosis Virus(TNV)at 5Å Resolution." Acta Crystallgr.D50. 878-883 (1994)
[文献書誌] 月原冨武: "X線結晶構造解析." 蛋白質・核酸・酵素. 39. 1263-1273 (1994)

1994 年度 実績報告書

球状ウイルスの高分解能X線結晶構造解析

研究代表者

月原 冨武 徳島大学, 工学部, 教授 (00032277)

研究成果

[文献書誌] H.Mizuno et al: "Crystallization and Preliminary X-ray Study of a Double-Shelled Sphevical Virus,Rice Dwarf Virus." J.Mol.Biol.219. 665-669 (1991)

[文献書誌] S.Yoshikawa et al: "Strategies for Crystallization of Large Membrane Protein Complexes." J.Crystal Growth. 122. 298-302 (1992)

[文献書誌] K.Shinzawa-Itoh et al: "Single Crystals of Bovine Heart Cytochrome c Oxidase at Fully Reduced States are Isomorphous with Each Other." J.Mol.Biol.228. 987-990 (1992)

[文献書誌] 福山恵一,月原冨武: "ウイルスの立体構造." バイオサイエンスと工業. 50. 27-32 (1992)

[文献書誌] H.Mizuno et al: "Crystallization and PreliminaryX-ray Studies of Wild Type and Catalytic-site Mutant Amylase from Bacillus subtilis." J.Mol.Biol.234. 1282-1283 (1993)

[文献書誌] 月原冨武,福山恵一: "分子置換法による球状ウイルスのX線結晶構造解析." 放射光. 6. 37-48 (1993)

[文献書誌] 月原冨武 他: "超分子複合体のX線結晶構造解析." 蛋白質・核酸・酵素. 38. 1247-1253 (1993)

[文献書誌] 月原冨武: "超分子複合体の構造解析." 生物物理. 33. 24-29 (1993)

[文献書誌] S.Ikemizu et al: "Crystal Structural Aanlysis of[2Fe-2S]Ferredoxin I from Equistum Arvense at 1.8Å Resolution." Acta Crystallgr.D50. 167-174 (1994)

[文献書誌] M.Bando et al: "Crystal Structure Analysis of Tobacco Nerosis Virus(TNV)at 5Å Resolution." Acta Crystallgr.D50. 878-883 (1994)

[文献書誌] 月原冨武: "X線結晶構造解析." 蛋白質・核酸・酵素. 39. 1263-1273 (1994)

1994 年度実績報告書

月原冨武徳島大学, 工学部, 教授 (00032277)

[文献書誌] 月原冨武他: "超分子複合体のX線結晶構造解析." 蛋白質・核酸・酵素. 38. 1247-1253 (1993)