DNA多型解析による父子判定と高等霊長類の繁殖戦略

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03454003
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 竹中 修 京都大学, 霊長類研究所, 教授 (00093261)
• 研究分担者: 大澤 秀行 京都大学, 霊長類研究所, 助教授 (60027498) ; 加納 隆至 京都大学, 霊長類研究所, 教授 (40045050) ; 杉山 幸丸 京都大学, 霊長類研究所, 教授 (20025349)
• キーワード: 霊長類 / 繁殖戦略 / 父子判定 / ジヌクレオチド / PCR / DNA多型 / チンパンジー / ニホンザル

研究概要

霊長類の多くの種では複数のオスと複数のメスが乱婚的な繁殖集団を形成する。母と子の関係は出産後の哺育行動から明らかであるが父親については行動記録から全く解らなかった。そこでチンパンジー等の高等霊長類について、DNA多型の解析による父子判定法の確立と野生群、飼育群への応用を目的とした。チンパンジーを一時的にせよ捕獲し血液を採取する事は全く不可能なので、繊維質の食物を与えたときに吐き出すシガミカスに含まれる口腔内細胞、体毛、糞表面の腸管細胞を分析試料としPCR法によりDNAを増幅し分析する方法を選んだ。
チンパンジーのDNAを制限酵素MboIで切断し、150-350bp分画をベクターに組み込み大腸菌にトランスフォームした。化学的に合成したGTリピートをプローブとしてGTジヌクレオチドリピートを含むDNA領域をクローン化し、塩基配列を決定してPCR法のためのプライマーを合成した。得られた15のプライマーセットの内6セットが多型を示ししかもその内3セットはきわめて高い多型性を示した。熊本県の三和化学研究所のチンパンジー繁殖飼育群で1983年以来生まれた49頭の個体の父親を決定し、1)オスの順位と残した子どもの数にある程度相関がある事、2)メスとオスとの永続的なペアー関係はない事、3)オスは9才くらいから子どもを残せる事等を明らかにした。ついでギニア国ボッソーの野生チンパンジーについて調べ群れ外オスとの間で子どもを残した例、またタンザニア国マハレの野生チンパンジーで観察者が母子と信じてきたメス2頭の間に血縁が無い事等を明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] M.Inoue,A.Takenaka,S.Tanaka,R.Kominami,O.Takenaka: "Paternity Discrimination in a Japanese Macaque Group by DNA Fingerprinting" Primates. 31. 563-570 (1990)
• [文献書誌] M.Inoue,F.Mitsunaga,H.Ohsawa,A.Takenaka,Ysugiyama,S.A.Gaspard,O.Takenaka: "Male Mating Behaviour and Paternity Discrimination by DNA Fingerprinting in a Japanese Macaque Group" Folia Primatologica. 56. 202-210 (1991)
• [文献書誌] O.Takenaka,H.Takasaki,S.Kawamoto,M.Arakawa A.Takenaka: "Poly morphic Microsatellite DNA Amplification Customized for Chimpanzee Paternity Testing" Primates. 34. 27-35 (1993)
• [文献書誌] M.Inoue,O.Takenaka: "Japanese Macaque Microsatellite PCR Primers for Paternity Testing" Primates. 34. 37-45 (1993)
• [文献書誌] O.Takenaka,S.Kawamoto,T.Udono,M.Arakawa,H.Takasaki,A.Takenaka: "Chimpanzee Microsatellite PCR Primers for Paternity Testing and an Application to a Captive Group" Primates. 34. (1993)