1993 年度実績報告書

フラビンを中心とした電子伝達機構に与える蛋白の重合反応の影響について

研究課題

研究課題/領域番号	03454122
研究機関	熊本大学
研究代表者	志賀潔熊本大学, 医学部, 教授 (40028527)
研究分担者	佐藤恭介熊本大学, 医学部, 助手 (80205905) 二科安三熊本大学, 医学部, 助教授 (50112553)
キーワード	フラビン蛋白 / 蛋白 / サブユニット / FAD / AMP / 蛋白のfolding / 蛋白の変性 / 電子伝達
研究概要	豚腎臓より得られるElectron-transferring flavoprotein(ETF)はheterodimerであり1分子のFADとAMPを含んでいる(Sato,Nishina,and Shiga(1933)J.Biochem.114,215-222)。本年度はふたつのサブユニット(alphaとbeta)の分離精製法を開発し、これらのサブユニットとAMP,FADよりNATIVEなホローETFの再構成に成功した。サブユニットの分離は尿素あるいはグワニヂンを用いETFを変生させることにより可能となり、得られた両サブユニットはUNFOLDING型となっている。これより変生剤を除去しAMP及びFADを共存させることによりNATIVE型ホローETFを再生できたのである。またFADのETFに対する結合は両サブユニット共存下でのみ可能であり、各サブユニット単独ではFADを結合できない。

[文献書誌] R.Miura: "C-AND N-NMR STUDIES ON MEDIUM-CHAIN ACYL-CoA DEHYDROGENASE" J.Biochem.113. 106-113 (1993)
[文献書誌] K.Sato: "ELECTRONN-TRANSFERRING FLAVOPROTEIN HAS AN AMP-BINDING SITE IN ADDITION TO THE FAD-BINDING SITE" J.Biochem.114. 215-222 (1993)
[文献書誌] Y.Nishina: "RESONANCE RAMAN STUDIES ON ACYL-CoA DEHYDROGENASES" FLAVINS AND FLAVOPROTIEINS. (in press).
[文献書誌] K.Sato: "ELECTRON-TRANSFERRING FLAVOPROTEIN FROM PIG KIDONEY CONTAINS AN AMP" FLAVINS AND FLAVOPROTEINS. (in press).
[文献書誌] Y.Nishina: "EFFECTS OF LIGANDS ON THE REACTIVITIS OF REDUCED AND SEMIQUINOID OF D-AMINO ACID OXIDASE" FLAVINS AND FLAVOPROTEINS. (in press).
[文献書誌] R.Miura: "C-AND N-NMR STUDIES OF MEDIUM-CHAIN ACYL-CoA DEHYDROGENASE FROM PIG KIDONEY" FLAVINS AND FLAVOPROTEINS. (in press).