1992 年度実績報告書

胃酸分泌酵素の発現調節機構に関する生化学的研究

研究課題

研究課題/領域番号	03454152
研究機関	大阪大学
研究代表者	前田正知大阪大学, 産業科学研究所, 助教授 (80190297)
研究分担者	田村茂彦大阪大学, 産業科学研究所, 助手 (90236753)
キーワード	胃壁細胞 / H^+ / K^+-ATPアーゼ / 胃酸分泌酵素 / 無酸症 / DNA結合蛋白 / H_2ヒスタミン受容体 / 転写調節 / 細胞分化
研究概要	胃壁細胞に特異的な転写調節因子の解析は、細胞の分化と細胞特異的な遺伝子発現と関連して重要な課題である。ヒトやラットの胃酸分泌酵素(H^+/K^+-ATPase)のαおよびβサブユニット遺伝子の上流に、胃特異的に結合するDNA結合蛋白質を同定し、このもののcDNAクローニングを行った。認識配列が(G/C)PuPu(G/C)NGAT(A/T)PuPyであることからGATA結合蛋白質と類似性があると推定したように、DNA結合領域がこれと相同性のある2種の蛋白質を新たに見つけた。それらをGATAst1,2と名付けたが、胃粘膜に特異的に発現しており、両者のin vivoの働きを解明することが次に重要になる。一方、ヒト胃ガン細胞由来のMKN45細胞にH_2ヒスタミン受容体mRNAが発現していることを見いだし、この細胞が壁細胞様形態を示すこととよくあっており、今後この細胞を用いる価値のあることが判明した。実際、この細胞には、GATAst1が発現していることを確認することができた。この他、H_2ヒスタミン受容体遺伝子のクローニングに成功し、その発現様式の検討を行えるようになっている。また、Cl^-チャンネルのクローニングにも着手し、対照となる筋肉型のものの特性を検討できるシステムを導入することができた。さらに、無酸症患者の血清を解析するために、H^+/K^+-ATPaseαサブユニットのcDNAを用いて部分配列を大腸菌に発現させた。各種部分配列に対する血清の反応性を調べると異なっており、疾病の原因や進行との関連を知る上で有用な実験系を確立できた。また、ブタの胃粘膜より調製した膜小胞をELISAに供することで、血清のスクリーニングにも利用できることを示した。このように、研究期間内に多くの新しい知見が得られ、さらに国際的に見ても独創性のある研究として将来的にも期待の大きい研究テーマに発展してきている。

研究成果
(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Shigehiko Tamura: "Sequence motif in control regions of the H^+/K^+-ATPase α and β subunit genes recognized by gastric specific nuclear protein(S)" FEBS Letters. 298. 137-141 (1992)
[文献書誌] Xiao-Hui Wang: "Characterization of human autoantibodies reactive to gastric parietal cells" Biochemical Biophysical Research Communications. (1993)
[文献書誌] Masahisa Hasebe: "Vacuolar type H^+-ATPase gene presence of four genes including pseudogenes for the 16 kDa proteolipid subunit in the human genome" Biochemical Biophysical Research Communications. 183. 856-863 (1992)
[文献書誌] Shunske Noguchi: "Assembly of a hybrid from the α subunit of Na^+/K^+-ATPase and the β subunit of H^+/K^+-ATPase" Biochemical Biophysical Research Communications. 182. 659-666 (1992)
[文献書誌] Kouichirou Shin: "F_0F_1-ATPase γ subunit mutations perturb the coupling between catatysis and transport" The Journal of Biological Chemistry. 267. 20835-20839 (1992)
[文献書誌] Hiroshi Omote: "Effect of mutations of conserved Lys-155 and Thr-156 residues in the phosphate-binding glycine-rich sequence of the F_1-ATPase β subunit of Escherichia coli" The Journal of Biological Chemistry. 267. 20571-20576 (1992)
[文献書誌] 前田正知(分担執筆): "新生化学実験講座6「生体膜と膜輸送(上)」" 東京化学同人, 25 (1992)
[文献書誌] 前田正知(分担執筆): "新生化学実験講座6「生体膜と膜輸送(下)」" 東京化学同人, 9 (1992)

1992 年度 実績報告書

胃酸分泌酵素の発現調節機構に関する生化学的研究

研究代表者

前田 正知 大阪大学, 産業科学研究所, 助教授 (80190297)

研究成果

[文献書誌] Shigehiko Tamura: "Sequence motif in control regions of the H^+/K^+-ATPase α and β subunit genes recognized by gastric specific nuclear protein(S)" FEBS Letters. 298. 137-141 (1992)

[文献書誌] Xiao-Hui Wang: "Characterization of human autoantibodies reactive to gastric parietal cells" Biochemical Biophysical Research Communications. (1993)

[文献書誌] Masahisa Hasebe: "Vacuolar type H^+-ATPase gene presence of four genes including pseudogenes for the 16 kDa proteolipid subunit in the human genome" Biochemical Biophysical Research Communications. 183. 856-863 (1992)

[文献書誌] Shunske Noguchi: "Assembly of a hybrid from the α subunit of Na^+/K^+-ATPase and the β subunit of H^+/K^+-ATPase" Biochemical Biophysical Research Communications. 182. 659-666 (1992)

[文献書誌] Kouichirou Shin: "F_0F_1-ATPase γ subunit mutations perturb the coupling between catatysis and transport" The Journal of Biological Chemistry. 267. 20835-20839 (1992)

[文献書誌] Hiroshi Omote: "Effect of mutations of conserved Lys-155 and Thr-156 residues in the phosphate-binding glycine-rich sequence of the F_1-ATPase β subunit of Escherichia coli" The Journal of Biological Chemistry. 267. 20571-20576 (1992)

[文献書誌] 前田 正知(分担執筆): "新生化学実験講座6「生体膜と膜輸送(上)」" 東京化学同人, 25 (1992)

[文献書誌] 前田 正知(分担執筆): "新生化学実験講座6「生体膜と膜輸送(下)」" 東京化学同人, 9 (1992)

1992 年度実績報告書

前田正知大阪大学, 産業科学研究所, 助教授 (80190297)

[文献書誌] 前田正知(分担執筆): "新生化学実験講座6「生体膜と膜輸送(上)」" 東京化学同人, 25 (1992)

[文献書誌] 前田正知(分担執筆): "新生化学実験講座6「生体膜と膜輸送(下)」" 東京化学同人, 9 (1992)