1991 年度実績報告書

恙虫病リケッチアの病原性と型特異的抗原蛋白の分子構造との相関性についての研究

研究課題

研究課題/領域番号	03454185
研究機関	新潟薬科大学
研究代表者	多村憲新潟薬科大学, 薬学部, 教授 (50027314)
研究分担者	大橋典男新潟薬科大学, 薬学部, 助手 (10169039) 浦上弘新潟薬科大学, 薬学部, 講師 (80139732)
キーワード	R.tsutsugamushi / 遺伝子クロ-ニング / PCR / 病原性 / 恙虫病診断 / 型特異抗原 / シグナルペプチド
研究概要	恙虫病リケッチア(Rickettsia tsutsugamushi)には、以前よりマウスに対し強毒性を示すGilliam,Karp,Katoの3血清型の存在が知られていた。我々はこれら以外で弱毒性のShimokoshi,Kawasaki,Kurokiの3血清型の存在を明かにし、且つ血清型決定因子は、リケッチア表層に存在する分子量54,000ー56,000(54ー56K)の型特異的抗原蛋白によることを示した。すなわち、54ー56K蛋白によって決定される血清型の差異によって病原性の強弱が異なることが判明した。平成3年度には、各型の54ー56K蛋白遺伝子をクロ-ニングし、上記6型の全塩基配列を明らかにすることに成功した。その結果、この遺伝子の5'ー末端側の非コ-ド領域には数個の直列に並んだプロモ-タ-領域が存在すること、及び3'ー末端側の非コ-ド領域には株によってヘアピンル-プ構造が存在することを見出した。またこの遺伝子の塩基配列から推測される54ー56K蛋白のアミノ酸の一次配列は疎水性領域と親水性領域を交互にもつ典型的な膜蛋白の構造を示しており、且つそのNー末端側には22ケのアミノ酸よりなるシグナルペプチドが認められた。さらにこの蛋白の分子構造を型間で比較すると、各血清型間で大きく異なる4つの可変領域が見出された。これらのうち型特異性を担う領域が病原性の強弱に関与すると思われる。これらの知見をもとに54ー56K蛋白遺伝子の各型に高い共通性を示す部分の塩基配列に対応するプロ-ブを作成し、それを用いたPCR法により、恙虫病の診断が可能であることが判明した。また、このPCR法で増幅したDNAを数種の制限酵素で切断した時のパタ-ンの比較により、各リケッチア株の型の同定が可能であることを見出した。現在この方法により、この遺伝子の構造(54ー56K蛋白の構造)とリケッチアの病原性との関連性を検討中である。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] A.Tamura,H.Urakami,and N.Ohashi: "A comparative view of Rickettsia tsutsugamushi and the other groups of rickettsiae." Europ.J.Epidemiol.7. 259-269 (1991)
[文献書誌] Furuya.Y.,S.Yamamoto,N.Ohashi,A.Tamura,A.Kawamura,Jr.他4名: "Use of monoclonal antibodies against Rickettsia tsutsugamushi Kawasaki for serodiagnosis by enzymelinked immunosorbent assay." J.Clin.Microbiol.29. 340-345 (1991)
[文献書誌] K.Kumura,Y.Minamishima,S.Yamamoto,N.Ohashi,and A.Tamura.: "DNA base composition of Rickettsia tsutsugamushi determined by reversed-phase high-performance liquid chromatography." International J.Systematic Bacteriol.41. 247-248 (1991)
[文献書誌] K.Amano,H.Hatakeyama,Y.Sasaki,R.Ito,A.Tamura,and T.Suto.: "Electron microscopic studies on the in vitro proliferation of spotted fever group rickettsia isolated in Japan" Microbiol.lmmunol.35. 623-629 (1991)
[文献書誌] Furuya.Y.,Y.Yoshida,N.Ohashi,A.Tamura,A.Kawamura,Jr.他3名: "Specific amplification of Rickettsia tsutsugamushi DNA from clinical specimens by polymerase chain reaction." J.Clin.Microbiol.29. 2628-2630 (1991)
[文献書誌] N.Ohashi,H.Nashimoto,H.Ikeda,and A.Tamura: "Diversity of immunodominant 56-kilodalton type specific antigen (TSA) of Rickettsia tsutsugamushi." J.Biol.Chem.

1991 年度 実績報告書

恙虫病リケッチアの病原性と型特異的抗原蛋白の分子構造との相関性についての研究

研究代表者

多村 憲 新潟薬科大学, 薬学部, 教授 (50027314)

研究成果

[文献書誌] A.Tamura,H.Urakami,and N.Ohashi: "A comparative view of Rickettsia tsutsugamushi and the other groups of rickettsiae." Europ.J.Epidemiol.7. 259-269 (1991)

[文献書誌] Furuya.Y.,S.Yamamoto,N.Ohashi,A.Tamura,A.Kawamura,Jr.他4名: "Use of monoclonal antibodies against Rickettsia tsutsugamushi Kawasaki for serodiagnosis by enzymelinked immunosorbent assay." J.Clin.Microbiol.29. 340-345 (1991)

[文献書誌] K.Kumura,Y.Minamishima,S.Yamamoto,N.Ohashi,and A.Tamura.: "DNA base composition of Rickettsia tsutsugamushi determined by reversed-phase high-performance liquid chromatography." International J.Systematic Bacteriol.41. 247-248 (1991)

[文献書誌] K.Amano,H.Hatakeyama,Y.Sasaki,R.Ito,A.Tamura,and T.Suto.: "Electron microscopic studies on the in vitro proliferation of spotted fever group rickettsia isolated in Japan" Microbiol.lmmunol.35. 623-629 (1991)

[文献書誌] Furuya.Y.,Y.Yoshida,N.Ohashi,A.Tamura,A.Kawamura,Jr.他3名: "Specific amplification of Rickettsia tsutsugamushi DNA from clinical specimens by polymerase chain reaction." J.Clin.Microbiol.29. 2628-2630 (1991)

[文献書誌] N.Ohashi,H.Nashimoto,H.Ikeda,and A.Tamura: "Diversity of immunodominant 56-kilodalton type specific antigen (TSA) of Rickettsia tsutsugamushi." J.Biol.Chem.

1991 年度実績報告書

多村憲新潟薬科大学, 薬学部, 教授 (50027314)