| 研究課題/領域番号 |
03454228
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| 研究機関 | 鹿児島大学 |
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研究代表者 |
有馬 暉勝 鹿児島大学, 医学部, 教授 (10116428)
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| 研究分担者 |
前田 栄樹 鹿児島大学, 医学部・附属病院, 助手 (70238856)
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| キーワード | C型肝炎ウイルス(HCV) / 遺伝子クローニング / 免疫スクリーニング / HCV抗体 / HCV-RNA / ポリメラーゼチェインリアクション(PCR) / ウイルス変異 / ワクチン |
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| 研究概要 |
C型肝炎ウィルス(HCV)の遺伝子構造が明らかにされ、診断面では各種第二世代のHCV抗体の開発により十分な感度で血清診断が可能となった。我々も独自にHCVの遺伝子のクローニングを行い、コア抗原と非構造蛋白(NS3領域)との複合抗原を用いた高感度の新しいHCV抗体検出系を開発した。
1.HCV遺伝子の免疫スクリーニングによるクローニング
C型肝炎患者血清よりAGPC法によりRNAを抽出し、ランダムプライマーを用いてλgtII-cDNAライブラリーを作成し、患者(急性C型肝炎患者回復期および慢性C型肝炎)血清を抗体として用いクローニングを行った。患者プール血清よりスタートしたひとつのcDNAライブラリーから幸運にも構造蛋白領域をコードするクローン2個を含むHCVの各領域の特異的cDNAクローンを得た。
2.新しい高感度HCV抗体検出系の開発
コア領域をコードするS29抗原とNS3領域をコードするS4抗原の混合抗原を用いたELISAによるHCV抗体測定系はきわめて高感度であり、現在開発されている第二世代HCV抗体検出系(アボットII)と同等以上の感度、特異性を有し、臨床応用が期待される。
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