エンドセリンファミリ-の生合成と分泌機構ならびに細胞内情報伝達系に関する研究

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03454512
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 平田 結喜緒 東京医科歯科大学, 医学部, 助教授 (50135787)
• 研究分担者: 七里 眞義 東京医科歯科大学, 医学部, 助手 (10206097) ; 丸茂 文昭 東京医科歯科大学, 医学部, 教授 (00050443)
• キーワード: エンドセリンー1 / レセプタ-サブタイプ / ホスホイノシト-ル / 細胞内Ca^<2+> / Cキナ-ゼ / 遺伝子発現 / 細胞増殖

研究概要

血管内皮と平滑筋の培養細胞でのエンドセリン(ET)レセプタ-サブタイプについて結合実験およびノ-ザン解折を行い、その情報伝達系も解析した。また内皮細胞,ヒト癌細胞株(HeLa、HEPG_2)でのETー1遺伝子の発現調節をノ-ザン解折によって検討した。血管平滑筋細胞ではETAレセプタ-が主に発現し、ホスホイノシト-ル代謝を促進してCa^<2+>の動員とチャネルを介したCa^<2+>の流入を促進するのに対し、血管内皮細胞ではET_Bレセプタ-が主に発現し、ホスホイノシト-ル代謝によるCa^<2+>動員によって一酸化窒素およびプロスタサイクリンの生成を促進した。血管内皮細胞ではトロンビン、アンジオテンシン、バゾプレッシンはそれぞれのレセプタ-を介してホスホイノシト-ル代謝を促進し、細胞内Ca^<2+>の上昇とCキナ-ゼの活性化によってETー1遺伝子が誘導された。ヒト癌細胞株ではETー1遺伝子の発現、ETー1の生合成と分泌、およびそのレセプタ-の発現がみられた。また外因性ETー1に対してCa^<2+>の流入および細胞増殖促進作用がみられ、この作用はETー1抗体により抑制された。血管平滑筋では主にETAレセプタ-が、血管内皮では主にET_Bレセプタ-が発現し、それぞれETの収縮および弛緩反応に関与して血管ト-タスを制御している。内皮でのETー1遺伝子発現調節にはレセプタ-を介した細胞内のCa^<2+>とCキナ-ゼという共通の細胞内伝達系が作動している。また、非内皮系癌細胞でETー1遺伝子が発現し、生成、分泌されたETー1がレセプタ-を介して細胞増殖を促進することは、ETー1がオ-トクリン様成長因子として腫瘍の自己増殖に関与している可能性を示唆する。したがってETは血管調節因子の役割に留らず細胞増殖因子としても成長、分化、癌化にも関与している可能性もあり、今後の検討が必要である。

研究成果

• [文献書誌] T.Emori: "Endothelinー3 stimulates production of endotheliumderived nitric oxide via phoshoinostide breakdown" Biochem.Biophys.Res.Commun.174. 228-235 (1991)
• [文献書誌] M.Shichiri: "Endothelinー1 is an autocrine 1 paracrine growth factor for human cncer cell lines." J.Clin.Invest.87. 1867-1871 (1991)
• [文献書誌] T.Emori: "Celluar mechanism of endothelinー1 release by angiotensin and vasopressin" Hypertension. 18. 165-170 (1991)
• [文献書誌] H.Ito: "Endothelinー1 induces hypertrophy with enchanced expression of muscle specific genes in cultured neonatol rat cardiomyocytes." cir.Res.69. 209-215 (1991)
• [文献書誌] T.Emori: "Endothelinー3 stimulates prostacyclin production in cultured bovine endothelial cells." J.Cardiovasc.Pharmacol.17(7). S140-S142 (1991)
• [文献書誌] S.Eguchi: "Identification of G proteinーcoupled endothelin receptors in cultured bovine endothelial cells." Biochem.Biophys.Res.Commun. 174. 1343-1346 (1991)
• [文献書誌] Y.Hirata(eds H.Matsuo,H.Imura): "Peptide Regulation of Cardiovascular Function" Academic Press, 428 (1991)
• [文献書誌] Y.Hirata(eds H.Imura,H.Matsuo,T.Masaki): "Atrial and Brain Natriuretic Peptides" Kodansha Scientific, 355 (1991)