脳腸ホルモンのスーパーアゴニストおよびアンタゴニストのデザインと開発

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03454520
• 研究機関: 静岡県立大学
• 研究代表者: 矢内原 昇 静岡県立大学, 薬学部, 教授 (80046250)
• キーワード: ガラニン / グリセンチン / クロモグラニンA / PTHrP / PACAP / スーパーアゴニスト / アンタゴニスト / 化学合成

研究概要

本研究の課題に基づき、1)、新規脳腸ホルモンの化学合成とその活性部位の発見、2)脳腸ホルモンに関するスーパーアゴニストおよびアンタゴニストの開発、3)合成ペプチドを用いる部位特異抗体の作製とその応用に関する研究を行い、下記の成果を得た。
1) ガラニンのスーパーアゴニストとして〔D-Trp^8〕galanin(1-15)-ol、アンタゴニストとして〔D-Thr^6,D-Trp^<8.9>〕galanin(1-15)-olを見いだした。また、腸管グルカゴンであるヒトグリセンチンの化学合成に成功した。
2) ヒト神経芽細胞培養細胞NB-OK-1におけるPACAP受容体、ヘロデルミン受容体およびVIP受容体についてPACAP、ヘロデルミンならびにVIP関連ペプチドを用い、その結合活性およびcAMP産生能を比較検討し、特に、PACAP拮抗物質PACAP(5-38)により、PACAP受容体をヘロデルミンおよびVIP受容体と明確に区別することができた。
3) ヒトクロモグラニンAフラグメントを用い、3種類の部位特異認識抗血清を作製した。特にC端特異抗血清を用い確立したラジオイムノアッセイ(RIA)系により血中免疫活性クロモグラニンAの測定が可能であることを明らかにし、また、その測定値が血中カテコラミンのそれによく相関することを示した。
4) 合成ヒトグリセンチンを用い、その特異抗体の作製に成功し、RIAの確立に成功した。
5) DTHrPアンタゴニストについても、数種のアンタゴニスト候補をデザインし、DTHrP(7-34)誘導体に強力なアンタゴニスト作用を見いだした。
以上、研究成果として、本研究ではガラニン、PACAP、PTHrPのアンタゴニストを特定するとともに、強力なガラニンアンタゴニストおよびPTHrPアンタゴニストを開発する基礎的情報を得た。

研究成果

• [文献書誌] Noboru Yanaihara: "Galanin analogues:agonist and antagonist" Regul.Pept.46. 93-101 (1993)
• [文献書誌] M.Hoshino,N.Yanaihara: "Pituitary adenylate cyclase activating peptide and vasoactive intestinal polypeptide:differentiation effects on human neuroblastoma NB-OK-1 cells21GC02:Neurosci.Lett." 159. 35-38 (1993)
• [文献書誌] Min Li,Noboru Yanaihara: "Helodermin analogues:structure-function studies of helodermin" Biomed.Res.14(3). 61-69 (1993)
• [文献書誌] Yoshio Murakami,Noboru Yanaihara: "Effect of human galanin on growth hormone,prolaction,and antidiuretic hormone secretion in normal men" J.Clinical Endocrinology and Metabolism. 77(5). 1436-1438 (1993)
• [文献書誌] David wynick,Noboru Yanaihara: "Characterization of a High-affinity galanin receptor in the rat anterior pituitary:Absence of biological effect and reduced membrane binding of the antagonist M15 differentiate it from the brain/gut receptor." Proc.Natl.Acad.Sci.USA.90. 4231-4235 (1993)
• [文献書誌] 長沢晋吾、矢内原昇: "ラット下垂体、視床下部および膵におけるクロモグラニンAのプロセッシングの比較" 消化管ホルモン. (XII). 346-356 (1993)
• [文献書誌] Tohru Mochizuki,Noboru Yanaihara: "Peptide Chemistry 1992" ESCOM Science Publishers B.V., 4 (1992)
• [文献書誌] Keiichi Ohshima,Noboru Yanaihara: "Peptide Chemistry 1992" ESCOM Science Publishers B.V., 3 (1992)