研究概要 |
ボトロセチンによるフォンビルブラント因子(vWF)活性化機構:既にBothrops jararaca蛇毒より精製に成功した(Biochemistry(1991)30,1957-1964)2本鎖ボトロセチンについてα,β両鎖の全アミノ酸配列に加え、ジスルフィド結合の位置も決定した(Proc.Natl.Acad.Sci.USA(1993)90,928-932)。相同性探索の結果,α,β両鎖共Ca^<++>依存性(Cタイプ)レクチンと高い相同性を示したが,のvWFとの複合体形成はEDTAにより阻害されないことから,レクチンとしてvWFの糖鎖を認識しているのではないものと推定した。次に2本鎖ボトロセチンを用い、IIA型,IIB型vWF病患者の血漿からのvWFとの結合や、それら複合体の血小板凝集作用の相違を検討した。またリストセチン血小板凝集を阻害する抗vWF単クローン抗体数種のうちで2種の抗体のみがボトロセチン血小板凝集を阻害することを明らかにし、両者のvWF結合部位は異なるが、近接しているものと推定した(Thromb.Haemostasis(1992)68,464-469).現在単クローン抗体を用いて血管内皮下組織のvWF活性化因子を探索中である。 ボトロンビンの精製,性質,構造:ボトロセチンの精製過程でBothr-ops jararacaの蛇毒中に強いトロンビン様活性を同定し、それを完全に純化してボトロンビンと命名した。トロンビン同様フィブリノーゲンに作用してフィブリンを形成するが、その際フィブリノペプチドAのみを遊離する。凝固第VIII因子を活性化するが、その活性はトロンビンと比べて遥かに弱く、またDFPによって阻害されるがヒルジンによる阻害は認められなかった。単独では血小板に作用しないが、フィブリノーゲン添加後の血小板を凝集する性質を示した。現在迄に231残基から構成されるその全一次構造を決定した(Biochemistry(1993)投稿準備中)。
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