動脈硬化症におけるスカベンジャー受容体と変性LDLの分子遺伝学

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03557032
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 児玉 龍彦 東京大学, 医学部(病), 助手 (90170266)
• 研究分担者: 土井 健史 大阪大学, 薬学部, 助教授 (00211409) ; 長野 洋幸 中外製薬(株), 研究所, 主席研究員 ; 貞広 隆造 中外製薬(株), 研究開発企画部, 部長 ; 永野 豊 京都大学, 医学部老年科, 助手 (80228048) ; 北 徹 京都大学, 医学部老年科, 教授 (60161460)
• キーワード: スカベンジャー受容体 / マクロファージ / 動脈硬化 / コレステロール / ラジカル反応 / コラーゲン / 抗酸化剤 / 遺伝子構造 / プロモーター

研究概要

本年度は、第一にスカベンジャー受容体の構造と機能,第二にLDLの変性機構,第三にLDLの変性抑制剤の検討をすすめ,血管壁における動脈硬化の細胞レベルでの成因の解明と,それに基づく治療法の開発が進んだ。
(1)ヒトスカベンジャー受容体遺伝子の構造解析をすすめ,染色体8番の120kbの遺伝子のエクソン・イントロン構造,プロモーター配列を決定し,さらに3種のRFLPにもとずく多型性を発見した。ヒト,ウシ,マウスにつづきウサギcDNAの全配列を決定した。蛋白質工学に基ずくリガンド結合ドメインの解析より,コンピューターモデリングにより受容体とリガンドの結合モデルを作成した。アセチルLDLと酸化LDLのスカベンジャー受容体への結合の37℃における差異が明かとなり,動脈硬化にいたる変性LDLの取り込み機構がはじめて分子レベルで明かとなった。
(2)LDLの酸化をひきおこすラジカルの産生方法に,金属イオン(CuSO4),化学物質(AAPH,AMVN),酵素(lipoxygenase)の各種を検討し,そのいずれもが,LDLcoreの脂質(コレステロールエステル)のラジカル産生をひきおこし,スカベンジャー受容体を介する取り込みにつながることが証明された。
(3)LDLの変性抑制剤の作用機構の解析をin vivo(WHHLウサギ)およびin vitroで進めた。LDLの抗酸化剤の作用の比較からコレステロールエステルのラジカルの産生を抑制することが抗動脈硬化に重要と思われた。この結果をもとに従来よりしられる抗酸化剤と新規に合成されたLDL抗酸化剤の作用の比較をすすめ,従来最も有効なプロブコールより強力な作用が確認された。さらにプロブコールがWHHLウサギ肝臓でコレステロールエステル転送蛋白のmRNAの発現を誘導することが証明された。

研究成果

• [文献書誌] Kurihara,Yukiko and et.al.: "Macrophage Scavenger Receptors" Current Opinion in Lipodology. 2(5). 295-300 (1991)
• [文献書誌] Naito,Makoto and et.al.: "tissue Distribution,Intracellular Lovalization,and In Vitro Expression of Bovine Macrophage Scavenger Receptors" Am J Pathol. 139(6). 1411-1423 (1991)
• [文献書誌] Hirakawa,T and et.al.: "Massive accumulation of neutral lipids in cells comditionally transformed by an activated H-ras oncogene" Oncogene. 6(2). 289-295 (1991)
• [文献書誌] 板倉 弘重: "スカベンジャー・レセプター" 現代医療. 25. 869-872 (1993)
• [文献書誌] 浅岡 等: "マクロファージのスカベンジャー受容体" 免疫薬理. 11. 63-69 (1993)
• [文献書誌] 栗原 由紀子: "スカベンジャー受容体の遺伝子構造と発生工学" セラピューティック・リサーチ. 13. 4707-4714 (1992)
• [文献書誌] 板倉 弘重: "アセチルLDL受容体" 現代医療. 23. 2739-2743 (1991)
• [文献書誌] 板倉 弘重: "Acetyl LDLレセプター" 現代医療. 23. 192-194 (1991)
• [文献書誌] 内藤 真: "スカベンジャーレセプターの構造および機能と細胞内発現" 医学のあゆみ. 157. 848-853 (1991)
• [文献書誌] 板倉 弘重: "スカベンジャー受容体とLDL受容体様蛋白体(LRP)" 代謝. 28. 251-262 (1991)
• [文献書誌] 板倉 弘重: "血管病変とスカベンジャーリセプター" 呼吸と循環. 39. 219-223 (1991)
• [文献書誌] 児玉 龍彦: "マクロファージのスカベンジャー受容体:生体防御、老廃物処理機能と動脈硬化" 生体防御. 8. 67-73 (1991)
• [文献書誌] 鈴木 宏志: "発生工学と動脈硬化" 最新医学. 5. 856-864 (1992)
• [文献書誌] 児玉 龍彦: "マクロファージの異物、老廃物処理を担うエンドサイトーシス型膜糖タンパク質" 生化学. 63. 335-350 (1991)
• [文献書誌] 朝岡 等: "スカベンジャー受容体の構造と機能" The Lipid. 2. 157-166 (1991)
• [文献書誌] 板倉 弘重: "動脈硬化とマクロファージ" 臨床科学. 27. 693-700 (1991)
• [文献書誌] 板倉 弘重: "スカベンジャー受容体" 臨床科学. 27. 463-469 (1991)
• [文献書誌] 児玉 龍彦: "マクロファージのスカベンジャー受容体と動脈硬化" 動脈硬化症研究の進歩. 12. 1-16 (1991)
• [文献書誌] 板倉 弘重: "マクロファージのスカベンジャーレセプター" The Lipid. 2. 461-470 (1991)
• [文献書誌] 板倉 弘重: "スカベンジャー受容体の発現と泡沫細胞の形成過程" Mebio. 8. 39-45 (1991)
• [文献書誌] Kume,N.,et al.: "Receptors for modified low-density lipoproteins endothelial cells:different recognition for acetylate low-density lipoprotein and oxidized low-density lipoprotein" Biochim.Biophys.Acta. 1091. 63-67 (1991)
• [文献書誌] Nagano,Y.,et al.: "High density lipoprotein loses its effect to stimulate efflux of cholesterol from foam cells after oxidative modification." Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 88. 6457-6461 (1991)
• [文献書誌] O'Brien,K.,et al.: "Probucol treatment affects the cellular composition but not anti-oxidized low density lipoprotein immunoreactivity of plaques from Watanabe Heritable Hyperlipidemic rabbits" Arteriosclerosis and Thrombosis. 11. 751-759 (1991)
• [文献書誌] Nagano,Y.,et al.: "Probucol and atherosclerosis in the Watanabe heritable hyperlipidemic rabbit--long-term antiatherogenic effect and effects on established plques." Atherosclerosis. 92. 131-140 (1992)
• [文献書誌] Hra,S.,et al.: "Probucol Pretreatment enhances the chemotaxis of mouse peritoneal macrophages." Arteriosclerosis and Thrombosis. 12. 593-600 (1992)
• [文献書誌] Tanaka,M.,et al.: "Requlation of apolipoprotein B production and secretion in response to the change of intracellular cholesteryl ester contents in rabbit hepatocytes." J.Biol.Chem.
• [文献書誌] Ueda,Y.,et al.: "Different expression of modified low density lipoprotein receptors in rabbit peritoneal macrophages and Kupffer cells." Atherosclerosis.
• [文献書誌] 和田 洋一郎: "スカベンジャーリセプター:血管の分子生物学" 中外医学社, 166