心筋における細胞増殖抑制因子の測定法の開発

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03557038
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 川口 秀明 北海道大学, 医学部・附属病院, 助手 (70161297)
• 研究分担者: 及川 恒之 (財)佐々木研究所, 細胞遺伝学部, 部長 (80150241)
• キーワード: PI-PLC / IP3 / TGFβ / C-myc / oncogene

研究概要

ホルモンおよび細胞増殖因子等の細胞外からの刺激が細胞表面の受容体よりGTP結合蛋白質を介してPI-PLCを活性化しDGとIP3という二つのsecond messengerを産生しプロテインキナーゼCを活性化し蛋白のリン酸化を起こす経路はliposomeを用いGTPおよびPLCを再構成させる実験より明らかになりつつある。心節細胞は新生児時期より分裂せず、成長につれて細胞の大きさのみ大きくなる。また心臓原発性の癌の報告も、転移癌の報告も少ない。このことから、心臓に何か強力な細胞増殖抑制因子の存在することが想像される。近年、肝腎においては線維芽細胞の細胞増殖を促進し、また実質細胞の細胞分裂を抑制し、さらにまた血管新生を促進させるtransforming growth factor β(TGFβ)が心筋梗塞のさいに心筋細胞に発現する事が報告され、心筋壊死層に於ける線維化促進に関与していると考えられる。しかし正常心筋細胞ではその発現が非常に弱く、TGFβとは違う抑制因子が心臓にあるのではないかと考えられる。本研究計画は細胞増殖抑制因子に着目し、c-myc oncogeneを培養心筋細胞にlipofection法を用いてtransfectionし、transfectionされない細胞と比較検討し細胞分裂を起こさず肥大することを確認する事にあった。本年度は血管平滑筋細胞、線維芽細胞にc-myc、h-rasをlipofection法にてtransfectionした。transfectionされた細胞ではいずれもPLC活性が上昇し、細胞ないへのCa取り込みも増加していた。DNA合成もtransfectionされた細胞で亢進していた。現在、更に心筋細胞をもちい検討するとともに、更に細胞増殖抑制因子の同定が進行中である。

研究成果

• [文献書誌] Hideaki Kawaguchi: "The studies of the cell damage and cell proliferation factors which induce cardiomyopathy." Jpn.Circ.J.56. 1037-1044 (1992)
• [文献書誌] Kazushi Urasawa: "The mechanism of cathecholamin-tolerance in heart failure:the change of Adenylyl cyclase system" Jpn.Circ.J.56. 456-461 (1992)
• [文献書誌] Mikako Shoki: "Phosphatidylinositol metabolism in hypertrophic rat heart" Jap.Circ.J.56. 142-147 (1992)
• [文献書誌] Kenji Iizuka: "Effect of hypoxia on calcium activated neutral protease activety in myocytes." Jpn.Heart J.33. 707-715 (1992)
• [文献書誌] Hirofumi Sawa: "Expression of the angiotensinogen gene and localization of its protein in the human heart" Circulation. 86. 138-146 (1992)
• [文献書誌] Hideaki Kawaguchi: "Inositolphosphatidesf metabolism en hypertrophic rat heart" J.Mol.Cell Cardiol.24. 1003-1010 (1992)
• [文献書誌] Hideaki KawaguchI: "PI resoinse calcium overload in cardiomyopathic hamster heart cells.New Aspect in the Treatiment of" Springer-Verlag, 5(36-40) (1992)
• [文献書誌] Kazushi Urasawa: "A mechanism of cathecholamin Tolerance in congestive heart failure New Aspect in the Treatment of Fa" Springer-Verlag, 6(75-80) (1992)