| 研究課題/領域番号 |
03557095
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| 研究機関 | 京都大学 |
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研究代表者 |
田端 守 京都大学, 薬学部, 教授 (60025682)
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| 研究分担者 |
上硲 和輔 武庫川女子大学, 薬学部, 教授 (60085280)
田中 重雄 京都大学, 薬学部, 助教授 (30115878)
福井 宏至 京都大学, 薬学部, 助教授 (80026575)
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| キーワード | ウリ科 / 植物培養細胞 / ヘチマ / Luffa cylindrica / テルペノイド / ブリオノ-ル酸 / 抗アレルギ-作用 |
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| 研究概要 |
ヘチマ(Luffa cylindrica)の培養細胞は、抗アレルギ-作用を示す五環性トリテルペン化合物ブリオノ-ル酸を、母植物に比べ大量に生成する。培養細胞のブリオノ-ル酸生産性をさらに向上させる目的で、二次代謝の誘導因子として知られているキチン、ポリガラクツロン酸、スペルミジンなどを培地に添加したが、本培養系には無効であった。そこで、ブリオノ-ル酸生合成上の特異な調節因子を調査するため、酵素液を調製し、標識前駆体の変換実験を行なった結果、メバロン酸からブリオノ-ル酸を生成する過程に、ATP、NADPH、Mg^<2+>、酸素が必須であり、閉環および酸化段階が、特に重要な調節過程であることがわかった。また本化合物は、電顕観察あるいは閉環酵素の局在性から、小胞体で生合成されvesicleで輸送後、細胞壁に蓄積されると推定されるため、人工血液(FC43emulsion)を培地に添加したところ、細胞壁中のブリオノ-ル酸は培地中に容易に溶出され、目的化合物の効率的な分離回収が可能となった。さらに細胞選抜を行い、現在乾燥重量当り収率7%の高含量株を得ており、能率的な生産技術系を確立しつつある。
広い抗アレルギ-スペクトルを示すブリオノ-ル酸のコハク酸エステル(p.o.)は、アラキドン酸あるいはTPA(フォルボ-ルエステル)で、マウスの耳に惹起した浮腫を、強く抑制することが明らかとなった。また、誘導体の構造活性相関をI型アレルギ-に対し検討した結果、29位より3位のコハク酸が、活性発現により重要であることが判明した。
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