モデル動物を用いた動脈硬化治療薬の開発およびスクリーニング

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03557116
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 北 徹 京都大学, 医学部, 教授 (60161460)
• 研究分担者: 成定 昌幸 塩野義製薬(株), 常務取締役研究所所長 ; 吉岡 秀幸 京都大学, 医学部, 助手 (30231690) ; 長野 豊 京都大学, 医学部, 助手 (80228048)
• キーワード: WHHL-ウサギ / HMG-CoA還元酵素 / 肝細胞 / プロブコール / LDL受容体

研究概要

動脈硬化治療薬のスクリーニング法の確立を目的として、昨年報告したごとく、家兎肝細胞培養系を作製することに成功した。しかも、この系にコラーゲンを添加することにより、家兎肝細胞の培養が容易になることを見い出し、研究の推進が計られた。
コントロール実験のため使用していたHMG-CoA還元酵阻害薬について新たなる知見を得ることができた。つまり、昨年度報告のごとく、HMG-CoA還元酵素阻害薬は、肝細胞のLDL受容体の発現誘導を惹起すること、さらに結果として血中LDLがこの効果により低下することがその効用として確認された。ところが、本剤を培養肝細胞に添加しつづけると、肝細胞におけるLDLの構造蛋白であるアポ蛋白B-100の分泌が低下することを新たに見い出した。さらに、本剤は細胞内のコレステリルエステルの合成量を減少することにより、アポ蛋白B-100の細胞内分解を促進することが明らかになり、結果として分泌量の低下を引き起こすことが明らかになった。アポ蛋白B-100のmRNAの発現量には影響を与えないことから、翻訳後調節であることが見い出された。コレステリルエステルの細胞内量により調節されている蛋白に、HMG-CoA還元酵素、LDL受容体があり、その詳細な分子機序を現在検討中である。この事実は高脂血症患者に対して新たな作用機序の薬剤として、今後臨床応用されることは疑う余地がない。なお、抗動脈硬化作用と抗高コレステロール血症作用を併せ持つ薬剤については引き続きスクリーニングを続けたいと考えている。

研究成果

• [文献書誌] Tanaka,M.,Jingami,H.,Otani,H.,Cho,M.,Ueda,Y.,Arai,H.,Nagano,Y.,Doi,T.&Kita,T.: "Regulation of apolipoprotein B production and secretion in response to the change of intracellular cholesteryl ester contents in rabbit hepatocytes." J.Biol.Chem.
• [文献書誌] Ueda,Y.,Arai,H.,Kawashima,A.,Nagano,Y.Cho,M.,Tanaka,M&Kita,T.: "Different expression of modified low density lipopeotein receptorsin rabbit peritoneal macrophages and kupffer cells." Atherosclerosis.
• [文献書誌] Kita,T.,Yokdoe,M.,Arai,H.,Iiyama,M.,Ueda,Y.,Ueyama,K&Narumiya,S.: "Cigarette smoke,LDL and cholestery ester accumulation in macrophages." Ann.N.Y.Acad.Sci.
• [文献書誌] Arai,H.,Nagano,Y.,Narumiya,S.&Kita,T.: "Decreased arachidonate metabolism in mouse peritoneal macrophages after foam cell transformation with oxidized low-density lipoproteins." J.Biochem.112. 482-487 (1992)
• [文献書誌] Hara,S.,Nagano,Y.,Sasada,M&Kita,T.: "Probucol pre-treatment enhances the chemotaxis of mouse peritoneal macrophages." Arterioselerosis and Thrombosis. 12. 593-600 (1992)
• [文献書誌] Nagano,Y.,Nakamura,T.,Matsuzawa,Y.,Cho.,M.,Ueda,Y.&Kita,T.: "Probucol and atherosclerosis in the Watanabe heritable hyperlipidemic rabbit--long-term antiatherogenic effect and effect one established plaques." Atherosclerosis. 92. 131-140 (1992)