| 研究概要 |
○FeーSセンタ-B(F_B)の再構成
ホウレンソウ光化学系I粒子では、HgCl_2処理によりF_Bが破壊され、NADP^+光還元が失活する。この失活がF_Bの破壊によって起こるという推論を証明するためにF_Bを再構成し、このときNADP^+光還元活性も回復するかどうかを調べた。F_B破壊標品をNa_2S,メルカプトエタノ-ル,FeCl_3と嫌気条件下、室温でインキュベ-トするとF_Bは約75%の収率で再構成されることがESR測定により確認された。このときNADP^+光還元活性は全く回復しなかった。ところが、再構成時にMg^2+を共存させると光還元活性も回復することが判った。以上の結果より、NADP^+光還元活性が失われた原因はF_Bの破壊によるものと結論した。なお、Mg^<2+>なしで再構成したのちMg^<2+>とインキュベ-トしても活性は回復しなかった。MgCl_2は、再構成時にタンパク質がNADP^+光還元活性のあるコンホメ-ションをとるのに必要だと考えられる(発表準備中)。
○緑色光合成細菌Chlorobiumのシステインに富むペプチドの研究
FeーSセンタ-を結合しているペプチドはcysに富むと予想されるので、その同定を試みた。菌体よりクロマトホア膜を調製し、SDSでセンタ-を破壊したのち蛍光性SH修飾剤(ABDーF)でcys残基を修飾した。界面活性剤により膜を可溶化し、ショ糖密度勾配超遠心により光化学反応中心粒子を精製した。そのペプチド組成をSDSーポリアクリルアミドゲル電気泳動により分析したところ40kDa,12kDaペプチドが蛍光試薬によって強く標識されていた。これらのペプチドを電気泳動により精製し、アミノ酸配列を決定中である。
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