1992 年度実績報告書

中枢神経系におけるAPUD細胞の機能形態学的研究

研究課題

研究課題/領域番号	03670027
研究機関	京都府立医科大学
研究代表者	岡村均京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (60158813)
研究分担者	田口淳一京都府立医科大学, 医学部, 助手 (50188132)
キーワード	aromaticL-aminoacid decarboxylase / ^3H-DOPA / in situ hybridization / オートラジオグラフィー / 視床下部
研究概要	ラット又は、ヒトのAromatic L-Aminoacid Decarboxylase(AADc)のcomplete seguenceを含むcDNAをNicle-Translationにて^<35>S-ATPで標識し、in situ hybridizationを行ないラット脳におけるAADcmRNAの分布を検索した。ラット中脳及び視床下部にAADc免疫陽性細胞の分布と一致してAADcmRNA陽性細胞を検出した。しかし、現在までのところTHmRNAのin situhybridizationの陽性シグナル量に比し、かなり、シグナル強度が低い。上記は、cDNAプローブでの結果であるが、現在更にシグナルの検出能力を上げるためAADcのcDNAをsubcloneし、それよりRNAプローブを作成している。また、^3H-DoPA取り込み能を持つ細胞in viroの条件で検索するため、^3H-DoPAの腹腔内注射を、新生仔期ラットで行なった。^3H-DoPAは、^3H-tyrosineから、精製tyrosine hydroxylase酵素純品を用いて、^3H-DoPAを精製したものを、横浜市大医学部薬理、後嶋、三須先生より供与していただいたものを用いた。ラットはresetpine(10mg/kg)Pargyline(40mg/kg)Ro-4-4602(50mg/kg)を前処置し、^3H-DoPA17.25×10^3μci/π又は、3×10^3μci/πを腹腔内投与し、60分後断頭した。クリオスタット切片(15μm)作成後オートラジオグラフィーを行った。^3H-DOPAの放射活性の最も強い部位は被殻尾状核に認められ、つづいて側坐核、嗅結節の順であった。視床下部は予想に反し大脳皮質と同程度の比較的弱い放射活性を示すのみであった。このことは、AADcニューロンが大量に存在する視床下部における^3-H-DOPA取り込み能は、通常の黒質線条体系の終末が存在する被殻尾状態よりも低いことを示している。しかし視床下部全域に中等度の放射活性が認められたことは、血中の^3H-DOPAは血液脳関門を通り、視床下部のニューロンに取り込まれ得ることを示している。

研究成果
(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Yamada,K.,Sakai,M.,Okamura,H.,et al.: "Detection of fyrosine hydroxylase and phenylethanolamine-N-methyl transferase messenger RNAS in the mouse adrenal gland and the brain by up situ hybridization." Histochemistry. 97. 201-206 (1992)
[文献書誌] Uno,T.,Hisa,Y.,Murakami,Y.,et al.: "Distribution of tyrosine hydroxylase immunoreactine fibers in the canine larynx." Eur.Arch,Otorhinolargngol. 249. 40-43 (1992)
[文献書誌] Okamura,H.,Tanaka,M.,et al.: "A simple combined tech nique of histofluorescene and peptide-immunocytochemistry for the analye of the coexistence of monoamines and peptide in brain stem neurons." Biogenic Amines. 9. 195-204 (1992)
[文献書誌] Matsumoto,Y.,Okamura,H.,et al.: "Immunocytochemical survey of haloperidol-induced immunoreactive changes of〔Met〕eukephalin-Arg^6-Gly^7-Leu^8 in the rat forebrain." Brain Res.Bull.28. 683-695 (1992)
[文献書誌] Tanaka,M.,Okamura,H.,et al.: "Diffeyential expression of serotonin and 〔Met〕enkephalin-Arg^6-Gly^7-Leu^8 in neurons of the rat brain stem." Brain Res.Bull.(1993)
[文献書誌] Yokoyama,C.,Okamura,H.,et al.: "Resistence of hypothalamic dopaminergic neurons to 6-hydroxydopamine toxicity." Brain Res.Bull.(1992)
[文献書誌] 岡村均: "組織細胞化学" 神経伝達物質レセプターの定量的invitro オートラジオグラフィー日本組織細胞化学編, 154-163 (1992)
[文献書誌] 岡村均: "医学のあゆみ" L-DOPA含有ニューロンの形態学, 823-826 (1992)

1992 年度 実績報告書

中枢神経系におけるAPUD細胞の機能形態学的研究

研究代表者

岡村 均 京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (60158813)

研究成果

[文献書誌] Yamada,K.,Sakai,M.,Okamura,H.,et al.: "Detection of fyrosine hydroxylase and phenylethanolamine-N-methyl transferase messenger RNAS in the mouse adrenal gland and the brain by up situ hybridization." Histochemistry. 97. 201-206 (1992)

[文献書誌] Uno,T.,Hisa,Y.,Murakami,Y.,et al.: "Distribution of tyrosine hydroxylase immunoreactine fibers in the canine larynx." Eur.Arch,Otorhinolargngol. 249. 40-43 (1992)

[文献書誌] Okamura,H.,Tanaka,M.,et al.: "A simple combined tech nique of histofluorescene and peptide-immunocytochemistry for the analye of the coexistence of monoamines and peptide in brain stem neurons." Biogenic Amines. 9. 195-204 (1992)

[文献書誌] Matsumoto,Y.,Okamura,H.,et al.: "Immunocytochemical survey of haloperidol-induced immunoreactive changes of〔Met〕eukephalin-Arg^6-Gly^7-Leu^8 in the rat forebrain." Brain Res.Bull.28. 683-695 (1992)

[文献書誌] Tanaka,M.,Okamura,H.,et al.: "Diffeyential expression of serotonin and 〔Met〕enkephalin-Arg^6-Gly^7-Leu^8 in neurons of the rat brain stem." Brain Res.Bull.(1993)

[文献書誌] Yokoyama,C.,Okamura,H.,et al.: "Resistence of hypothalamic dopaminergic neurons to 6-hydroxydopamine toxicity." Brain Res.Bull.(1992)

[文献書誌] 岡村 均: "組織細胞化学" 神経伝達物質レセプターの定量的invitro オートラジオグラフィー日本組織細胞化学編, 154-163 (1992)

[文献書誌] 岡村 均: "医学のあゆみ" L-DOPA含有ニューロンの形態学, 823-826 (1992)

1992 年度実績報告書

岡村均京都府立医科大学, 医学部, 助教授 (60158813)

[文献書誌] 岡村均: "組織細胞化学" 神経伝達物質レセプターの定量的invitro オートラジオグラフィー日本組織細胞化学編, 154-163 (1992)

[文献書誌] 岡村均: "医学のあゆみ" L-DOPA含有ニューロンの形態学, 823-826 (1992)