カテコールアミン生合成における刺激ー転写連関について

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03670115
• 研究機関: 産業医科大学
• 研究代表者: 柳原 延章 産業医科大学, 医学部, 助教授 (80140896)
• キーワード: イオンチャンネル / カテコールアミン生合成 / 細胞刺激 / セカンドメッセンジャー / 蛋白リン酸化酵素 / チロシン水酸化酵素 / mRNA / 転写調節

研究概要

カテコールアミン生合成の律速酵素であるチロシン水酸化酵素は、長時間刺激による神経細胞の興奮や持続的ストレスなどにより、交感神経系や副腎髄質においてその酵素活性並びに酵素蛋白が増加してくること(酵素誘導)が知られております。しかしながら細胞刺激から酵素誘導に至るまでの詳細な機序については十分に理解されておりません。
今回著者は、そのモデルとして培養副腎髄質細胞を用いて(1)細胞刺激ー情報伝達系、(2)細胞刺激ーカテコールアミン生合成及び(3)チロシン水酸化酵素mRNA転写調節機序に関する研究を行いました。その結果(1)に関する研究では(1)細胞をオカダ酸(プロティンフォスファターゼ阻害剤)で長時間処理するとカルバコールによるカテコールアミン分泌が抑制されそれはCa^<2+>流入抑制によること、(2)ベラトリジンで細胞を刺激するとCa^<2+>流入に続きジアシルグリセロール産生の増加とプロティンキナーゼCの活性化が生じる、(3)Ca^<2+>/カルモデュリンキナーゼIIはスタウロスポリンによって阻害されること等が明らかとなり報告した。(2)に関する研究では(4)ナトリウム利尿ペプチドであるANP及びBNPはcyclic GMP産生を増加させることによりチロシン水酸化酵素のリン酸化と活性化を引き起こし、(5)ウニ毒はニコチン性アセチルコリン受容体ーイオンチャンネルを阻害することによりカテコールアミン生合成及び分泌を抑制する、(6)培養細胞を臨床治療濃度のリチウムで1週間処理するとカテコールアミン生合成、分泌及びチロシン水酸化酵素活性が増加してくること、これにプロティンキナーゼCが関与している可能性が示され報告した。(3)に関する研究では(7)オカダ酸で培養細胞を処理するとチロシン水酸化酵素活性が上昇し、一方そのmRNAは逆に減少していることがわかった。(8)更に培養細胞をNaCl高張液で数日間処理しておくとチロシン水酸化酵素活性及びそのmRNAレベルが増加してくることがわかった。この様にチロシン水酸化酵素活性の増加とmRNAレベルの増加が相関している場合や、逆にmRNAレベルを低下してる場合もあり、チロシン水酸化酵素mRNA転写調節機序を考える上において興味ある結果だと思われた。今後この転写調節機序についてもう少し詳しい検討が期待される。

研究成果

• [文献書誌] Yanagihara,N.: "Staurosporine: An effective inhibitor for Ca^<2+>/ calmodulin-dependent protein kinase II." Journal of Neurochem.56. 294-298 (1991)
• [文献書誌] Yanagihara,N.: "Inhibitory effect of okadaic acid on carbachol-evoked secretion of catecholamines in cultured bovine adrenal medullary cells." Biochem. Biophysic. Res. Commun.174. 77-83 (1991)
• [文献書誌] Yanagihara,N.: "Stimulatory effects of brain natriuretic peptide on cyclic GMP accumulation and tyrosine hydroxylase activity in cultured bovine adrenal medullary cells." Naunyn-Schmiedeberg′s Arch.Pharmacol.343. 289-295 (1991)
• [文献書誌] Sashihara,S.: "Overproduction of voltage-dependent Na^+ channels in the developing brain of genetically seizure-susceptible El mice." Neuroscience. 48. 285-291 (1992)
• [文献書誌] Uezono,Y.: "Veratridine causes the Ca^<2+>-dependent increase in diacylglycerol formation and translocation of protein kinase C to membranes in cultured bovine adrenal medullary cells." Naunyn-Schmiedeberg′s Arch. Pharmacol.346. 76-81 (1992)
• [文献書誌] 寺尾 岳: "培養牛副腎髄質細胞におけるカテコールアミン生合成に対するリチウムの影響" 脳と精神の医学. 3. 327-331 (1992)
• [文献書誌] Nakagawa,H.: "Inhibition of nicotinic acetylcholine receptor-mediated secretion and synthesis of catecholamines by sea urchin toxin in cultured bovine adrenal medullary cells." Biochem. Pharmacol.44. 1779-1785 (1992)
• [文献書誌] Terao,T.: "Lithium chloride stimulates catecholamine synthosis and secretion in cultured bovine adrenal medullary cells." Biol.Pschiatry. 31. 1038-1049 (1992)
• [文献書誌] Wada,A.: "Neosurugatoxin: A probe for neuronal nicotinic receptors in adrenal medulla, brain and ganglia." Methods in Neurosciences,Neurotoxins. 8. 311-322 (1992)
• [文献書誌] Wada,A.: "Cooperative modulation of voltage-dependent sodium channels by brevetoxin and classical neurotoxins in cultured bovine adrenal medullary cells." J. Pharmacol. Exp. Ther.263. 1347-1351 (1992)