マウス老化アシロイドーシス発症修飾因子の分子遺伝学的解析

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03670171
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 樋口 京一 京都大学, 胸部疾患研究所, 講師 (20173156)
• 研究分担者: 細川 昌則 京都大学, 胸部疾患研究所, 助教授 (00127135) ; 竹田 俊男 京都大学, 胸部疾患研究所, 教授 (00027088)
• キーワード: 老化促進モデルマウス(SAM) / 老化アミロイド-シス / 交配実験 / トランスジエニックマウス

研究概要

マウス老化アミロイドーシス発症には沈着蛋白であるapoAーIIの一次構造が重要であり、typeCのapoAーIIを持つ個体はアミロイドーシスを発症しやすい。アミロイドーシス発症機構の分子遺伝学的解析によって本年度に得られた新たな知見は以下の述べる事実である。1、交配実験による解析:アミロイドーシス好発系(SAMーP/1;apoAーIIはtypeC)と嫌発系(SAMーR/1;apoAーIIはtypeB)との交配実験の結果、14ヶ月齢でのアミロイドーシス発症はtypeCのapoAーIIをホモにもつ個体でのみ発症し、アミロイドーシス発症はapoAーIIの分子形と連鎖し、常染色体劣性で遺伝する事が確認された。しかしながら発症の重篤度は他の遺伝的要因が関与していることが判明した。そこでtypeCのapoAーIIを持ちながらアミロイドーシス発症の軽度なA/J系マウスとSAMーP/1との交配実験を行ったところF 1 hybridマウスは全て重度のアミロイド沈着を示し、12ヶ月齢のF2マウス肝臓の沈着個体数は無沈着個体数の約2.5倍であった。これらの事実よりapoAーII以外のアミロイドーシス発症修飾因子の数は1〜2個で常染色体優勢に遺伝する事が示唆された。現在これらの遺伝子の染色体上の位置を決定するため、マウス内在性ウイルスのプロ-ブ、microーsatelliteを利用した系を確立中である。2、Transgenic mice,Congenic mouseの作製:typeCのapoAーIIをSAMーR/1の受精卵に導入したtransgenic mouseの作製に成功しアミロイド沈着、老化の進行、apoAーIIの代謝等を検索中である。またtypeCのapoAーII遺伝子をSAMーR/1の遺伝的背景に、あるいはtypeBのapoAーII遺伝子をSAMーP/1に入れたcongenic mouse(SAMーR/1ApoAー2c,SAMーP/1Apoa2b)の作製が進行しており、特にSAMーR/1ApoAー2cは10世代を経過し開発に成功した。3、その他:タンパク質の質を替えた食事によるアミロイドーシス発症の修飾、アミロイドーシス発症時のアポ蛋白の代謝動態等についての解析を現在実施中である。

研究成果

• [文献書誌] Higuchi Keiichi: "Mouse senile amyloidosis;ASSAM Amyloidosis in mice is unuversally presents as a systemic ageーassociated" Virchows Arch.B,Cell.Pathol.60. 231-239 (1991)
• [文献書誌] Higuchi Keiichi: "Polymorphism of apolipoprotein AーII(apoAーII)among inbred strains of mice;relationship between the molecular type of apoAーII and mouse senile amyloiosis." Biochemical Journal. 279. 427-433 (1991)
• [文献書誌] Naiki Hironobu: "Kinetic analysis of amyloid fibril polymerezation in vitro." Lab.Invest.65. 104-110 (1991)
• [文献書誌] Takeda Toshio: "SenescenceーAccelerated Mouse(SAM);a novel model of accelerated senescence." J.Amer.Geriatr.Soc.39. 911-919 (1991)
• [文献書誌] Naiki Hironobu: "Fluorometric examination of tissue amyloid fibril in murine senile amyloidosis;use of the fluorescent indicator,Thioflavine T." Lab.Invest.62. 768-773 (1990)
• [文献書誌] Yoshioka Hideyuki: "Immunohistochemical examination of Peyer's patches in senescenceーaccelerated mice." Autoimmunity. 8. 221-228 (1990)
• [文献書誌] Higuchi Keiichi: "Molecular genetic study of mouse senile amyloidosi.in“Amyloid and Amyloidosis 1990"" Kluwer Academic Publishers,
• [文献書誌] Naiki Hirinobu: "Kinetic Properties of amyloid fibril Polymerization in vitro in “amyloid and Amyloidosis 1990"" Klewer Academic Publishers, 937(4) (1990)