1992 年度実績報告書

滑膜細胞破壊とEBウィルスの研究(遺伝子増幅法とウィルス感染実験)

研究課題

研究課題/領域番号	03670341
研究機関	日本大学
研究代表者	澤田滋正日本大学, 医学部・第一内科, 助教授 (40130520)
研究分担者	三田村巧日本大学, 医学部・第一内科, 助手武井正美日本大学, 医学部・第一内科, 助手
キーワード	EBウィルス / RT-PCR法 / RA滑膜 / EBNA-1 mRNA / プライマー
研究概要	平成4年度においては、慢性関節リウマチ(RA)患者末梢血滑膜組織においてEpstein-Barr(EB)ウィルスが実際に蛋白として発現しているかを検討した。末梢単核球およびRA・OA患者滑膜よりグアニジン/セシウムクロライド法によりRNAを抽出し、reverse transcriptase(RT)下で1時間反応させた。プライマーはEBNA-1領域のFプロモーター特異的なものとエクソンUとKとの接合部を間にはさまったもを使用した。得られたcDNAよりpolymerase chain reaction(PCR)法にてIR-1,3の部を増幅しSouthern blot法で検出を試みた。まずRA患者末梢血をphorbor esterで刺激し得られたEBNA陽性の単クローン性B細胞株(TKS-ET)をコントロールとして使用し、RT-PCR法におけるプライマーの検定をおこなった。使用したプライマーのうちEBNA-1のmRNAのUKエクソンの部位を増幅しうるものが安定して検体特異的なバンドを検出できた。以後このプライマーを使用した。血沈40/h以上のRAのうち腋下または、上腕内側にリンパ節腫脹を伴う群(m=5)と伴わない群(n=5)に分け調べたが、EBmRNAの発現はRA・正常(n=5)とも認めなかった。1例のムチランス型と成人型スティル病活動期と非活動期も同時に検討したが,EBmRNAは検出されなかった。又滑膜組織中のEBNA-1のmRNAは、RA・OAとも検出されなかった。今回の研究においては、EBNA-1のmRNAは末梢単核球、滑膜とも検出されなかった。しかしRAにおいてEB関連の抗体価は血清中で高いことは明らかであり、経過中のある時期にmRNAが強く発現されEB関連蛋白がどこかで正常より強く持続して発現されていることは十分に考えられる。最新の報告では、Cプロモーター特異的なプライマー使用によるRT-PCR法で末梢リンパ球のEBNAのmRNAが初めて検出されており、今後プライマーを変えてRT-PCR法での検討を要すると考えられた。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Sanada.S, Sugai,S,Iijima M et al: "Incrersed soluble CD4 and decreased soluble CD8 molecules in patients with sjogren′s syndrome" Am. J. Mod. (USA). 92. 134-140 (1992)
[文献書誌] Lemoine R, Berney T, Shibata T, et all: "Induction of wire-loop lesious by murine monoclonal IgG3 cryoglobulins" Kidrey International (USA). 41. 65-72 (1992)
[文献書誌] Iizuka Y, AisoM, Ohshima T, et al: "Serum soluble CD4, CD8 and IL-2R levels in adult auete my eloid leukemia in remission" Med Oncol Tumor Pharmacol (USA). 19. 57-64 (1992)
[文献書誌] Kubo N, Arashiwa Y, Yoshida ,M et al: "Questionaire surveys of cascs of ticho bite and Lyme borreliosis in hunters in Hokkaido with" Internal Med (JAPAN). 31. 1163-1168 (1992)
[文献書誌] Sawada S, Iijima S, Hashimoto H, et al: "Immunologic significamse of increased soluble CD8, CD4 mdecules in patients with systemic lupus erythematosus" J.clin.Lab Anal (USA).
[文献書誌] SawadaS, IijimaS, Shida,T et al: "Increased soluble IL-2 reception in serum patients with systemic lupus erythematosus" Clin Rheumatol ( Belgium).
[文献書誌] 澤田滋正,武井正美: "最新内科学大系-リウマチ性疾患の臨床検査" 中山書店,

1992 年度 実績報告書

滑膜細胞破壊とEBウィルスの研究(遺伝子増幅法とウィルス感染実験)

研究代表者

澤田 滋正 日本大学, 医学部・第一内科, 助教授 (40130520)

研究成果

[文献書誌] Sanada.S, Sugai,S,Iijima M et al: "Incrersed soluble CD4 and decreased soluble CD8 molecules in patients with sjogren′s syndrome" Am. J. Mod. (USA). 92. 134-140 (1992)

[文献書誌] Lemoine R, Berney T, Shibata T, et all: "Induction of wire-loop lesious by murine monoclonal IgG3 cryoglobulins" Kidrey International (USA). 41. 65-72 (1992)

[文献書誌] Iizuka Y, AisoM, Ohshima T, et al: "Serum soluble CD4, CD8 and IL-2R levels in adult auete my eloid leukemia in remission" Med Oncol Tumor Pharmacol (USA). 19. 57-64 (1992)

[文献書誌] Kubo N, Arashiwa Y, Yoshida ,M et al: "Questionaire surveys of cascs of ticho bite and Lyme borreliosis in hunters in Hokkaido with" Internal Med (JAPAN). 31. 1163-1168 (1992)

[文献書誌] Sawada S, Iijima S, Hashimoto H, et al: "Immunologic significamse of increased soluble CD8, CD4 mdecules in patients with systemic lupus erythematosus" J.clin.Lab Anal (USA).

[文献書誌] SawadaS, IijimaS, Shida,T et al: "Increased soluble IL-2 reception in serum patients with systemic lupus erythematosus" Clin Rheumatol ( Belgium).

[文献書誌] 澤田 滋正,武井 正美: "最新内科学大系-リウマチ性疾患の臨床検査" 中山書店,

1992 年度実績報告書

澤田滋正日本大学, 医学部・第一内科, 助教授 (40130520)

[文献書誌] 澤田滋正,武井正美: "最新内科学大系-リウマチ性疾患の臨床検査" 中山書店,