癌抑制遺伝子(p53)の発現異常からみた大腸癌および腺腫の悪性度に関する研究

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03670624
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 森元 秀起 大阪大学, 医学部, 助手 (70220085)
• 研究分担者: 門田 卓士 大阪大学, 医学部, 助手 (20174477) ; 島野 高志 大阪大学, 医学部, 講師 (80144476)
• キーワード: 癌抑制遺伝子 / p53 / 大腸癌 / 大腸腺腫 / 免疫組織化学 / in situ hybridization

研究概要

大腸癌、大腸腺腫および腺腫内癌における癌抑制遺伝子産物p53の発現異常を免疫組織学的に検討した。外科的に切除された大腸癌136例および内視鏡的に切除された大腸ポリ-ブのmicrowave固定パラフィン包埋標本134例に対し、p53の抗体染鉄を行なった。大腸癌では91例(66.9%)にp53が検出されたが、癌の組織型や進行度との相関は認められなかった。一方、腺腫内に癌病巣の認められた19例中14例(73.7%)でも、微小癌巣に一致してp53蛋白の発現が認められたのに対し、大腸腺腫107例では14例(13.1%)で一部の腺管に限局したp53の染色像が得られた。
このp53陽性腺管の病理組織学的異型度は、周囲の陰性腺管と比べて相違は認められなかった。これらの大腸腺腫に対し、細胞増殖能を反映するとされるproliferatingーcell nuclear antigen(PCNA)の細胞発現を抗体染色を用いて検討したところ、p53の染色が認められない腺管でのPCNA標識率が約30%であるのに対し、p53陽性腺管では平均50%以上と有意に高く、p53陽性腺管での細胞増殖能が上昇していることが示唆された。
合成プライマ-を用いてPCR法によりp53遺伝子の第5〜8exonに対応する塩基配列をプロ-ブとして作製し、凍結保存した大腸癌組織14例におけるp53遺伝子のmutationを検討した。p53遺。院のmutationはp53の免疫染色陽性例8例中7例で検出され、p53の免疫染色がmutationの有無を反映することが示された。現在、PCR法を用いて、腺腫におけるp53遺伝子の変異の有無を検索中である。

研究成果

• [文献書誌] Nakanishi,H.: "Perforin expression in lymphocytes infiltrated to human colorectal cancer." British Journal of Cancer. 64. 239-242 (1991)
• [文献書誌] Orita,S.: "A novel point mutation at codon 146 of the Kーras gene in a human colorectal cancer identified by the polymerase chain reaction." Virus Genes. 5. 75-79 (1991)
• [文献書誌] Kawasaki,Y.: "Immunohistochemical study of p53 expression in microwaveーfixed paraffin sections of colorectal carcinomas and adenomas." American Journal of Clinical pathology. 97. 244-249 (1992)
• [文献書誌] Yagyu,T.: "Use of a local immunotherapy as an adiunctive tool for the generation of human monoclonal antibodies from regional lymphnodes of colorectal cancer patients." Japanes Journal of Cancer Reserch. 83. 20-23 (1992)
• [文献書誌] Monden,T.: "Use of fihrinogen to enhance the antitumor effect of OKー432 ーa new approach to immunotherapy for colorectal carcinoma." Cancer. 69. 636-642 (1992)
• [文献書誌] Monden,T.: "A comparative immunohictochemical study of p53 and heat shock protein expression in microwaveーfixed paraffinーemhedded sections of colorectal tumors." Acta Histochemica et Cytochemica.
• [文献書誌] Baba,M.: "A human monoclonal antibody derived from axillary lymphnodes of a breast cancer patient reactive to a sulfated glycolipid." Hybridoma.
• [文献書誌] 森元 秀起: "癌抑制遺伝子p53と熱ショック蛋白の発現からみた大腸癌悪性度。" 日本外科学会誌. 92. 1094-1097 (1991)
• [文献書誌] 森元 秀起: "大腸癌におけるp53遺伝子の発現とその機能。" 消化器科. 14. 140-146 (1991)
• [文献書誌] 森元 秀起: "消化器癌の分子生物学的面からみた病態とその機序(監修:松尾 裕)分担執筆:大腸癌と遺伝子異常。(pp51ー63)" 東洋店書, 87 (1992)