| 研究概要 |
抗CEA抗体AB5C10の精製を行い,これと抗CD3抗体(OKT3)のBifunctional Antibody(BFA)を作成した。
得られたBFA(AB5C10*OKT3)はCEA産生型cell lineのKATOIIIを用いてFlowcytometry(FCM)でCEAとの反応性を検討した。その結果,ほぼ100%がpositiveでありAB5C10*OKT3のCEAとの反応性が確認した。
同様に末梢血単核球(PBMC)とAB5C10*OKT3との反応性をFCM検討した.その結果,約80%がpositiveでCD3との反応性が確認された.
次にKATOIIIをtarget cell,PBMCをeffector cellとして,AB5C10*OKT3の細胞障害活性増強効果を^<51>Crrelease assayを用いて行った.その結果,E/Tratioが100/1でcontrol群の%specific lysisが5.6%に対し,BFA添加群では15.3%と約3倍の細胞障害活性増強効果を認めた.また,effector cellにLAK cell(PBMCをIL-2存在下で72時間培養)を用いAB5C10*OKT3の細胞障害活性増強効果をみた結果,E/Tratioが12/1でcontrolに比べ55%の細胞障害活性増強効果を認めた.
AB5C10*OKT3の細胞障害活性増強効果におけるdose dependencyを検討した結果,0.1mug/mlで増強効果がみられた.
以上より,in vitroでのAB5C10*OKT3が細胞障害活性増強効果を誘導することがわかった.
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