| 研究課題/領域番号 |
03670773
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
久保田 俊郎 東京医科歯科大学, 医学部・産婦人科学, 講師 (50126223)
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| 研究分担者 |
鎌田 周作 東京医科歯科大学, 医学部・産婦人学科, 助手 (80169606)
麻生 武志 東京医科歯科大学, 医学部・産婦人学科, 教授 (60093176)
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| キーワード | エンドセリン-1 / ブタ顆粒膜細胞 / 細胞培養 / ステロイド産生 / 細胞内情報伝達系 / エンドセリン受容体 / 卵胞液 |
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| 研究概要 |
平成4年度までに、ブタ顆粒膜細胞からの性ステロイド分泌に及ぼすendothelin-1(ET-1)の影響、ET-1受容体の存在と細胞内情報伝達系の変動などについて探究した。顆粒膜細胞培養系において、ET-1はProgesterone(P)分泌を有意に上昇させたが、estradiol(E_2)分泌には有意な変化を与えず、この作用発現には細胞内情報伝達系として細胞内カルシウム濃度[Ca^<2+>]_iの変化と細胞内イノシトール燐脂質代謝系が関与することを示した。またブタ類粒膜細胞におけるET-1受容体の検索では、単一で高親和性のET-1受容体が存在することを証明し、その内容はJournal of Endocrinology(1992)に掲載された。それに加え、ブタ顆粒膜細胞からのET-1産生・分泌機序に焦点を絞り、ブタ中・小卵胞より得られた顆粒膜細胞の培養液中のET-1濃度を特異的RIAにて測定し、顆粒膜細胞からのET-1分泌を証明した。また、分子生物学的手法により細胞内におけるET-1のmRNAレベルでの検討を行なった。培養顆粒膜細胞から抽出したpoly(A)^+RNAについて、ヒトプレプロET-1のcDNAをプローブとしてNorthern解析を行ない、ET-1の合成能を証明した。この報告は、Journal of Endocrinological Investigationに投稿中である。さらにヒト卵胞液中にも高濃度のET-1が存在し、小卵胞(直径15mm以下)由来の卵胞液中の方が高いことを示した。
以上平成4年までの研究により、ブタ顆粒膜細胞から合成・分泌されるET-1はこの細胞自身の膜受容体に結合し、細胞内のイノシトール燐脂質代謝系を経て[Ca^<2+>]_iを上昇させ、細胞からのP分泌を促進することが明らかとなり、ET-1の顆粒膜細胞に及ぼすparacrine/autocrine作用が証明された。
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