| 研究課題/領域番号 |
03670777
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
倉内 修 名古屋大学, 医学部, 助手 (80195528)
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| 研究分担者 |
水谷 栄彦 名古屋大学, 医学部, 助教授 (00159162)
田中 雅嗣 名古屋大学, 医学部, 助教授 (60155166)
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| キーワード | 胎盤 / 子定日超過 / 子宮内胎児発育遅延 / ミトコンドリア遺伝子 / 変異蓄積 / チトクロ-ムオキシダ-ゼ / DNAコピ- / プロモ-タ- |
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| 研究概要 |
スラブゲル乾燥機(モデル583ゲルドライヤ-、バイオラッド)を平成3年7月に購入した。またDNA合成装置をもちいて今回の実験で使用予定の数種の合成オリゴヌクレオタイドをすでに作成した。
予定日超過、子宮内胎児発育遅延及び妊娠中毒症を含めた異常妊娠胎盤20例につきミトコンドリアDNAを抽出しPCR法によりミトコンドリアDNAを増幅してレ-チッヒの欠失と呼ばれる5kbの欠失を検討したが、このような大きな遺伝子変異は発見されなかった。これは、胎盤のような増殖が盛んな臓器では大きな変異の蓄積が行われにくいものと考えられた。コントロ-ルとして用いた人卵巣トコンドリアDNAでは、閉経期を過ぎるとこの欠失が認められ、しかも年齢が進むにつれてこの欠失の割合が増加することが示された。今後、胎盤においては、より小さな欠失に的を絞って検索するとともに今回購入したスラブゲル乾燥器を使用してDirect sequence法により点変異の発見を行う予定である。
また上記の胎盤より同時に抽出したmーRNAによりNothern blot hybridization法によりミトコンドリアDNA遺伝子にコ-ドされるたんぱくであるチトクロ-ムオキシダ-ゼサブユニットIの発現を調べたところ予定日超過、子宮内胎児発育遅延及び妊娠中毒症を含めた異常妊娠胎盤において正常胎盤に比しその発現が低下しているという新知見が得られた。この原因を検索するため、細胞一個あたりのミトコンドリアDNAのコピ-数をSouthern blot hybridization法により調べたところ、正常胎盤と異常妊娠胎盤の間には有意なミトコンドリアDNAのコピ-数の差は認めなかった。従ってミトコンドリア遺伝子の発現低下の原因として、異常妊娠胎盤ではミトコンドリア遺伝子プロモ-タ-になんらかの異常があるものと考えられた。
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