| 研究概要 |
研究費補助の決定通知を受けた平成3年10月末より、次の3点を当初の計画として研究を開始した。
1) ウサギゲノムライブラリ-の作成
2) cDNAを用いてのスクリ-ニング
3) PCR法によるクロ-ニング。
この内、1)については、日本日色種ウサギの肝DNAを抽出し、入ファ-ジベクタ-を用いたライブラリ-作成を行なった。さらに、Ross Hardison博士(米国ペルシルバニア大)の協力を得て、ウサギゲノムライブラリ-の分与を受けた。
2)については、上記2つのゲノムライブラリ-のスクリ-ニングをcDNA(Motojima & Goto,BBA1008,116(1989))を用いて2度行なった。その結果、Hardrson博士のライブラリ-より、1クロ-ンを得ることができた。現在までに決定した塩基配列から、このクロ-ンには、ラットの遺伝子構成と全く同じ(Motojima & Goto,FEBS Lett.264 156(1990))エクソンの6〜8番同が含まれていることが判明した。しかし、問題のプロモ-タ-領域は含まれている可能性は少なく、今後、さらにスクリ-ニングするか、ライブラリ-の作り直しが必要になるものと思われる。
3)については、平成3年度の私学助成で、DNA合成機とPCRインキュペ-タ-が導入され、研究開始が可能になった段階である。2)に対して有効な手段にやるものと期待している。
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