膵島アミロイド蛋白遺伝子の発現とII型糖尿病の成因との関係解明に関する研究

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03671130
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 金塚 東 千葉大学, 医学部, 助手 (40134366)
• 研究分担者: 宮崎 純一 東京大学, 医学部, 教授 (10200156) ; 牧野 英一 千葉大学, 医学部, 講師 (50009578)
• キーワード: 膵島アミロイド蛋白 / アミリン / 糖尿病 / 遺伝子 / トランスジェニックマウス / 膵ランゲルハンス氏島 / 膵島アミロイド / 糖尿病モデル動物

研究概要

膵島アミロイド蛋白(IAPP)はII型糖尿病にみられる膵島アミロイド沈着の主成分蛋白であり、同糖尿病の成因との関係が注目される。同蛋白の発現異常、膵島アミロイド沈着と同糖尿病の発症ないし進展との関係を解明するために、本研究では、1)II型糖尿病モデル動物におけるIAPP遺伝子発現と合成・分泌について、2)IAPP発現培養膵B細胞株におけるIAPP合成と分泌の機序について、3)ヒトIAPP遺伝子のプロモ-タ-機能について、4)ヒトIAPP発現トランスジェニックマウスにおける膵島アミロイド沈着とII型糖尿病の発症ないし進展について検討する。肥満およびII型糖尿病モデル動物の膵IAPP含量をラジオイムノアッセイ法を用いて測定した。IAPP含量および分泌は著明に増加していることから、肥満・糖尿病患者でIAPPの合成・分泌が亢進している可能性が示唆され、国際糖尿病学会で報告し、論文を発表した。培養膵B細胞株におけるIAPP発現についてRNA blotting法、ラジオイムノアッセイ法および免疫組織化学法を用いて検討した結果、新しい膵B細胞株(MIN6)においてIAPPが発現していることを確認した。この培養系を用いてIAPPの合成・分泌の機序を検討することが可能であり、国際糖尿病学会で報告し、論文を発表予定である。Polymerase chain reaction法による直接シ-クエンス法を用いてヒトIAPP遺伝子の5'側上流を解析し、糖尿病患者と健康人を比較検討した。日本糖尿病学会で報告し、現在論文を投稿中である。ヒトIAPP遺伝子とインスリン・プロモ-タ-遺伝子をマウスの授精卵に導入してトランスジェニックマウスを作製することに成功した。ヒトIAPPとII型糖尿病発症との関係について現在検討中である。ヒトII型糖尿病患者膵について免疫組織化学法により検討し、日本糖尿病学会で報告し、論文を発表した。

研究成果

• [文献書誌] Haruhiko Ohsawa,Azuma Kanatsuka,Yoshiharu Tokuyama et al,: "Amyloid protein in somatostatinoma ditters from human islet amyloid polypeptide" Acta Endocrinologica. 124. 45-53 (1991)
• [文献書誌] 金塚 東: "膵島アミロイド蛋白/アミリンとNIDDM" 監學のあゆみ. 156. 954-957 (1991)
• [文献書誌] 金塚 東,牧野 英一,徳山 芳治,大澤 春彦,吉田 尚: "肥満および糖尿病動物における膵島アミロイド蛋白の変動" 分子糖尿病学. 2. 43-48 (1991)
• [文献書誌] 金塚 東: "膵島アミロイド蛋白とII型糖尿病" 内分泌学の進歩. 8. 170-180 (1991)
• [文献書誌] Yoshiharu Tokuyama,Azuma Kanatsuka,Haruhiko Ohsawa,et al.: "Hypersecretion of islet amyloid polypeptide from pancreatic islets of Ventromedial hypothalamic lesioned rats and obese Zucker rats" Endocrinology. 128. 2739-2744 (1991)
• [文献書誌] 徳山 芳治,金塚 東,大澤 春彦,斎藤 丈夫,高田 和史,牧野 英一,吉田 尚,井上 修二,西村 正彦: "肥満と糖尿病動物における膵アミロイド蛋白含量と分泌の異常" Peptide Hormones in Pancreas. 11. 83-87 (1991)
• [文献書誌] 金塚 東: "膵島アミロイド蛋白/アミリンー膵島アミロイド蛋白とインスリン非依存型糖尿病ー" Medical Practice. 9. 158-159 (1992)
• [文献書誌] Haruhiko Ohsawa,Azuma Kanatsuka,Yoshiatsu Mizuno,et al.: "Islet amyloid polypeptideーderivied amyloid deposition increases along with the duration of type 2 diabetes mellitus" Diabetes Research and Clinical Practia. 15. 17-22 (1992)
• [文献書誌] Azuma Kanatsuka,Hideichi Makino,Takahide Yamaguchi,et al.: "Islet amyloid polypeptide/amylin in a pancreatic Bーcell line derived from transgenic mouse insulinoma" Diapetes.