細胞における甲状腺ホルモン作用の分析:ホルモン応答性核蛋白の誘導機構とその機能

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03671141
• 研究機関: 信州大学
• 研究代表者: 市川 和夫 信州大学, 医学部・附属病院, 講師 (40159835)
• キーワード: 甲状腺ホルモン / ペルオキシゾーム / T3 responsive element / 細胞内T_3輸送 / 細胞周期 / 核T_3受容体 / 細胞増殖 / dRLh-84

研究概要

1)ラット肝細胞の甲状腺ホルモン応答性t蛋白(ペルオキシゾームのbifunctional enzyme)が、ラットの甲状腺摘除後に蛋白量とmRNA量が増加し(Biochem Biophys Res Commun 185:211,1992)、少量のT3(0.3-1.0μg/100g体重)投与後に迅速に(24時間以内)減少する事を平成4年に報告した。平成5年はCAT assayによりgenomic DNAの5'上流域(-1600bp)にnegativeなT3 responsive elementの存在を示し、甲状腺ホルモンによるt蛋白のnegative regulationは転写活性の調節による事を確認した(manuscript in preparation)。
2)甲状腺ホルモン応答性のラット肝細胞核蛋白(n蛋白)のcDNAを用いた実験で、T3によるn蛋白の増加はmRNAの増加によるものである事を示した。このcDNAが真にn蛋白のcDNAであることを証明する為の作業を進めているが、依然n蛋白のcDNAの全長が得られておらず、部分的に解析されたアミノ酸配列との比較も出来ていない。
3)前年度の研究において残された課題である、T3の核への移行について、核に移行するT3はcarrierを介してエネルギー依存性に取り込まれたT3であり、さらに核外から核内へのT3の取り込みについても独自の調節機構が存在することを解明した(Endocrinology 130:2317,1992)。さらにこの研究の延長として、T3とT4においては細胞内の輸送機構は異なる事を示した。T4と違いT3の細胞外から核内への移行は細胞周期の各時期で異なり、s期において取り込みが最も多く、またこの時期に核受容体数も増加していた。
さらに培養ラット肝癌細胞(dRLh-84)において、T3は細胞増殖作用を示したが、この作用はs期を短縮する事によるものであった。すなわちs期には細胞へのT3の取り込みと核受容体数の増加とともにT3作用が増大する事を見いだした(manuscript in preparation)。

研究成果

• [文献書誌] Kazuo Ichikawa: "Minireview:Cellular binding proteins of thyroid hormones." Life Sciences. 49. 1513-1522 (1991)
• [文献書誌] Takahide Miyamoto: "Purification and characterization of thyroid hormone-responsive rat hepatic proteins." Endocrinology. 129. 907-914 (1991)
• [文献書誌] Kazuo Ichikawa: "Purification of human c-erbAβ protein" J.Mol.Endocrinol. 7. 123-129 (1991)
• [文献書誌] Satoru Suzuki: "Ontogenesis of the high affinity NADPH-dependent cytosolic 3,5,3′-triiodo-L-thyronine-binding protein in rat." ENDOCRINOLOGY. 129. 2571-2574 (1991)
• [文献書誌] Mutsuhiro Kobayashi: "A novel NADPH-dependent cytosolic 3,5,3′-triiodo-L-thyronine binding protein(CTBP;5,1s)in rat liver." Endocrinology. 129. 1701-1708 (1991)
• [文献書誌] Kazuo Ichikawa: "Recognition of a 56KDa protein in partially purified rat hepatic nuclear thyroid hormone receptor by anti-human c-erbAβ antibody." Endocrinol Japon. 39. 203-207 (1992)
• [文献書誌] Kazuo Ichikawa: "Heat shock decreases nuclear transport of 3,5,3′-triiodo-L-thyronine in clone 9 cells." Endocrinology. 130. 2317-2324 (1992)
• [文献書誌] Teiji Takeda: "Regulation of rat hepatic peroxisomal eroyl-CoA hydratase-3-hydroxyacyl-CoA olehydrogenase bifunctional enzyme" Biochem Biophys Res Commun. 185. 211-216 (1992)
• [文献書誌] Yutaka Nishii: "Induction of cytosolic triiodo-L-thyronine(T_3)binding protein(CTBP)by T_3 in primary cultured rat hepatocytes." Endocrine Journal. 40. 399-404 (1993)
• [文献書誌] Yutaka Nishii: "n-Butyrate enhances induction of thyroid hormone-responsive nuclear protein" Endocrine Journal. 40. 515-521 (1993)
• [文献書誌] Kazuo Ichikawa: "Neuroendocrine Research Methods" B.Greenstein(ed)Harwood Academic Publishers,London, 11 (1991)
• [文献書誌] Kazuo Ichikawa: "Progress in Thyroid Research" A.Gordon,J.Gross,G.Hennemann(eds)AA Balkema,Rotterdam, 4 (1991)
• [文献書誌] Kazuo Ichikawa: "High-altitude Medicine" G.Ueda,J.T.Reeves,M.Sekiguchi(eds) Shinshu University Press.Matsumoto, 5 (1992)
• [文献書誌] Teiji Takeda: "Progress in Thyroid Research" A.Gordon,J.Gross,G.Hennemann(eds) AA Balkema,Rotterdam, 3 (1991)