巨核芽球性白血病細胞の細胞内シグナル伝達系と癌遺伝子産物

1991 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03671175
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 佐藤 武幸 千葉大学, 医学部, 講師 (30187207)
• 研究分担者: 角田 治美 国立柏病院, 厚生技官
• キーワード: CMK細胞 / PDGF(血小枝由来増殖因子) / cーraf / Retinoic acid / シグナル伝達 / 癌遺伝子

研究概要

我々は従来より、佐藤らが樹立した巨核芽球性白血病細胞株(CMK)を用い、癌遺伝子の解析を行ってきたが、最近CMK細胞の血小板由来増殖因子(PDGF)産生を遺伝子レベルとタンパク質レベルで確認した。さらにPDGFのCMK細胞に対する作用を検討するため、培養液中にPDGFを加えると、PDGFをコ-ドするcーsis遺伝子の発現増加が認められ、CMK細胞がオ-トクライン機構で刺激されていることが推測された。我々は、この増殖機構のシグナル伝達物質としてセリン・スレオニンキナ-ゼ活性を有するcーrafタンパクに注目し、PDGF添加後のcーraf mRNAの発現量を検討したところ、2日間の培養にて発現の増加を確認した。CMK細胞の培養液中に種々の分化誘導剤及び増殖因子を加え、cーraf mRNAの発現量を検討したが、PDGF以外ではAll trans retinoic acidにおいてのみcーraf mRNAの発現増加が認められ、その他のCMK細胞増殖・分子因子であるGMーCSF、ILー3、TPA等では認められなかった。現在、cーraf遺伝子の特異性につき検討を進めている。
All trans retinoic acidは24時間以内にCMK細胞のcーraf mRNAを数倍増加させるが、長期間培養液中に加えて行くと4週目以降では、逆にcーraf mRNAの発現量が投与以前に比べて強度に抑制されることが確認された。現在、cーraf mRNAレベルの低下した細胞での細胞内シグナル伝達が正常に行われるか否か、PDGFを用い検討を進めている。

研究成果

• [文献書誌] Fuse A,Kakuda H,Shima Y,Dame JV,Billiau A and Sato T: "Interleukin6,a pssible autocrine growth and differentiation factor for the human megakaryocytic cell line,CMK" British Journal of Haematology. 77. 32-36 (1991)
• [文献書誌] Sakaguch M,Sato T and Groopman JE: "Human immunodeficiency virus infection of megakaryocytic cells" Blood. 77. 481-485 (1991)
• [文献書誌] Iida S,Yoshida T,Naito K,sakamoto H,Katoh O,Hirohashi S,Sato T,Onda M,Sugimura T,Terada M: "Human hstー2 oncogene:cDNA cloning and characterization" Oncogene.
• [文献書誌] Nagano T,Ohga S,Kishimoto Y,Kimura T,Yasunaga K,Adachi M,Ryo R,Sato T: "Ultrastructural analysis of platelatーlike particles from a human megakaryocytic leukemia cell line(CMK)" International Journal of Hematology.