巨核芽球性白血病細胞の細胞内シグナル伝達系と癌遺伝子産物

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 03671175
• 研究機関: 千葉大学
• 研究代表者: 佐藤 武幸 千葉大学, 医学部, 講師 (30187207)
• 研究分担者: 角田 治美 国立がんセンター, 東病院, 厚生技官
• キーワード: CMK細胞 / Retinoic acid / c-raf / c-fos / c-myc / シグナル伝達 / 癌遺伝子 / PDGF(血小板由来増殖因子)

研究概要

巨核芽球性白血病細胞株(CMK)はAll trans retinoic acid(RA)処理によりc-raf mRNAの発現が数倍増加されるが、長期間培養液中に加え続けると4週目以降では、逆にc-raf mRNAの発現量は投与以前に比べて強度に抑制されることが確認された。この様なc-raf mRNAレベルの低下した細胞での細胞内シグナル伝達について検討した。
CMK細胞を12時間無血清状態にて培養し、その後牛胎児血清(FCS)を添加し核内癌遺伝子であるfos遺伝子の発現を検討した。RA処理によりc-raf mRNA発現量の低下した細胞においては、fos遺伝子の発現が無処理細胞と比較し著しく低下していた。発現量の時間的推移については、共にFCS添加後15-30分をピークとし、以後徐々に減少し両者に差は認められなかった。同様に核内癌遺伝子であるc-mycについて検討したが、両者で発現に全く差が認められず、myc遺伝子はraf遺伝子を介する伝達系に関与しない事が示唆された。
CMK細胞をフォルボールエステル(TPA)で処理すると低分子量G蛋白質smg p21遺伝子の発現が著しく増加した。そこでc-raf遺伝子の発現とsmg p21遺伝子の発現との相関について現在検討を進めている。またCMK細胞はGM-CSF、IL-3、IL-6、IL-11等に反応し増殖・分化が誘導される。これら因子は直接raf遺伝子の発現に影響を及ぼさなかったが、RA処理によりraf遺伝子発現の低下した細胞における増殖・分化に及ぼす影響について、検討を進めている。

研究成果

• [文献書誌] Nagano,T.: "Ultrastructural analysis of platelet-like particles from a human megakaryocytic leukemia cell line (CMK11-5)." Int.J.Hematol.56. 67-78 (1992)
• [文献書誌] Adachi,M.: "Induction of smg p21/rap1A p21/krev-1 p21 gene expression during phorbol ester-induced differentiation of a human megakaryocytic leukemia cell line." Oncogene. 7. 323-329 (1992)
• [文献書誌] Iida,S.: "Human hst-2(FGF-6)oncogene:cDNAcloning and characterization." Oncogene. 7. 303-309 (1992)
• [文献書誌] Katoh,O.: "Expression of the heparin-binding growth factor receptor gene in human megakaryocytic leukemia cells." Biochem.Biophys.Res.Comm.183. 83-92 (1992)
• [文献書誌] Akiyama,Y.: "Tumor necrosis factor-α stimulates colony formation by a megakaryoblastic leukemia cell line,CMK." Jpn.J.Cancer Res.83. 989-994 (1992)
• [文献書誌] Miura,K.: "Stimulatory effect of tumor necrosis factor-α on the growth of CMK,a human megakaryoblastic leukemia cell line." Leukemia Res.16. 281-285 (1992)