1992 年度実績報告書

HPLC/ESR法とLC/MS法によるフリーラジカルの構造決定

研究課題

研究課題/領域番号	03808037
研究機関	和歌山県立医科大学
研究代表者	岩橋秀夫和歌山県立医科大学, 教養部, 助教授 (50145926)
キーワード	フリーラジカル / 脂質過酸化 / HPLC / ESR / MS / エチルラジカル / ペンチルラジカル / スピントラッピング / ペンテニルラジカル
研究概要	昨年度は大豆リポキシゲナーゼ反応や鉄-ADP系で生成する不飽和脂肪酸由来ラジカルの構造決定を行なってきた。大豆リポキシゲナーゼとリノール酸、リノレイン酸、アラキドン酸との反応に於いて反応中間体として、それぞれのエポキシラジカルとペンチル及びペンテニルラジカルの存在を明らかにした。鉄-ADP系とマイクロゾームとの反応においてはペンチルラジカルの存在を明らかにしてきた。プロスタグランジン合成酵素とアラキドン酸との反応について、Masonらは、ESRスピントラッピング法を用いて炭素中心アラキドン酸ラジカルを検出している。しかしそのラジカル種の構造については議論の余地があった。そこで本年度はプロスタグランジン合成酵素とアラキドン酸との反応についてHPLC/ESR法を適用した。スピントラップ剤として、4-POBNとPBNを用いて、HPLC/ESR法での分析を検討した。スピントラップ剤としてPBNを用いた時はHPLC/ESR法での分析に十分なラジカル濃度が得られなかった。4-POBNのスピンアダクトについてHPLC/ESR法で分析を行なったところ、数本のピークが検出された。そのうち最も保持時間の長いピークについては合成サンプルと比較することによりペンチルラジカルであることを明らかにした。その他のピークの同定は今のところ行なわれていない。またLC/MS分析についてもそれぞれのピークについて試みたが、それらの強度が小さいため成功していない。リノール酸の過酸化物と鉄イオン系で検出されるDMPOスピンアダクトについて、アルコキシラジカルかヒドロキシラジカルであるのか論争があった。そこで、HPLC/ESR法を適用することによりヒドロキシラジカルであることを決定した。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] T.Ishii,H.Iwahashi,R.Sugata,R.Kido: "Formation of Hydroxanthommatin-Derived Radical in the Oxidation of 3-Hydroxykynurenine" Arch.Biochem.Biophys.294. 616-622 (1992)
[文献書誌] H.Iwahashi,C.E.Parker,K.B.Tomer,and R.P.Mason: "Detection of the ethyl radical and pentyl radical adducts of α-(4 pyridyl-1-oxide)-N-tert-butylnitrone in rat liver microsomes treated with ADP,NADPH and ferric chloride" Free Rad.Res.Comms.16. 295-301 (1992)
[文献書誌] W.Chamulitrat,H.Iwahashi,D.J.Kelman,and R.P.Mason: "Evidence against the 1:2:2:1 quartet DMPO spectrum as the radical adduct of the lipid aloxy radical" Arch.Biochem.Biophys.296. 645-649 (1992)
[文献書誌] T.Ishii,H.Iwahashi,R.Sugata,and R.Kido: "Oxidation of 3-hydroxykynurenine catalyzed by methemoglobin with hydrogen peroxide" Free Radical Biology and Medicine. 13. 17-20 (1992)
[文献書誌] H.Iwahashi,C.E.Parker,R.P.Mason,and K.B.Tomer: "Combined lipid chromatography/electron paramagnetic resonance spectrometry/electrospray ionization mass spectrometry for radical identification" Anal.Chem.64. 2244-2252 (1992)
[文献書誌] 尾崎幸洋岩橋秀夫: "生体分子分光学入門" 共立出版, 270 (1992)

1992 年度 実績報告書

HPLC/ESR法とLC/MS法によるフリーラジカルの構造決定

研究代表者

岩橋 秀夫 和歌山県立医科大学, 教養部, 助教授 (50145926)

研究成果

[文献書誌] T.Ishii,H.Iwahashi,R.Sugata,R.Kido: "Formation of Hydroxanthommatin-Derived Radical in the Oxidation of 3-Hydroxykynurenine" Arch.Biochem.Biophys.294. 616-622 (1992)

[文献書誌] H.Iwahashi,C.E.Parker,K.B.Tomer,and R.P.Mason: "Detection of the ethyl radical and pentyl radical adducts of α-(4 pyridyl-1-oxide)-N-tert-butylnitrone in rat liver microsomes treated with ADP,NADPH and ferric chloride" Free Rad.Res.Comms.16. 295-301 (1992)

[文献書誌] W.Chamulitrat,H.Iwahashi,D.J.Kelman,and R.P.Mason: "Evidence against the 1:2:2:1 quartet DMPO spectrum as the radical adduct of the lipid aloxy radical" Arch.Biochem.Biophys.296. 645-649 (1992)

[文献書誌] T.Ishii,H.Iwahashi,R.Sugata,and R.Kido: "Oxidation of 3-hydroxykynurenine catalyzed by methemoglobin with hydrogen peroxide" Free Radical Biology and Medicine. 13. 17-20 (1992)

[文献書誌] H.Iwahashi,C.E.Parker,R.P.Mason,and K.B.Tomer: "Combined lipid chromatography/electron paramagnetic resonance spectrometry/electrospray ionization mass spectrometry for radical identification" Anal.Chem.64. 2244-2252 (1992)

[文献書誌] 尾崎 幸洋 岩橋 秀夫: "生体分子分光学入門" 共立出版, 270 (1992)

1992 年度実績報告書

岩橋秀夫和歌山県立医科大学, 教養部, 助教授 (50145926)

[文献書誌] 尾崎幸洋岩橋秀夫: "生体分子分光学入門" 共立出版, 270 (1992)