非免疫系抗腫瘍性因子の構造と機能

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04151055
• 研究機関: 京都府立医科大学
• 研究代表者: 今西 二郎 京都府立医科大学, 医学部, 教授 (40112510)
• 研究分担者: 西川 克三 金沢医科大学, 医学部, 教授 (10029960) ; 武田 健 昭和大学, 医学部, 助教授 (80054013) ; 宮崎 香 横浜市立大学, 木原生物学研究所, 助教授 (70112068) ; 田中 亮 名古屋市立大学, 医学部, 教授 (90094383) ; 鈴木 不二男 大阪大学, 歯学部, 教授 (40028717)
• キーワード: 非免疫系 / 抗腫瘍性因子 / TDF / コンドロモジュリン / グリオスタチン / NBCF / TRF / GMF

研究概要

本年度の計画としては、各種非免疫系抗腫瘍性因子の精製と生物活性を検討することであった。今までのところ、精製に関してはすべての因子について大きな進展がみられた。なかでも、軟骨組織中に存在するコンドロモジュリン-I(ChM-1)についてはクローニングに成功した。その結果、ChM-1前駆体は、335残基のアミノ酸からなり、そのC末端部に121残基からなり、しかも3ヶ所に糖鎖結合部位をもつ成熟ChM-1がコードされていることがわかった。神経線維腫に含まれるグリオスタチンを種々のカラムクロマトグラフィーを用いて精製したところ、100kDaのものが2量体をしていることがわかった。さらにこの精製グリオスタチンについて、アミノ酸配列を調べたところ、12個のアミノ酸配列が決定できた。しかもその配列が血小板由来血管内皮細胞増殖因子(PD-ECGF)のそれと一致していることがわかった。さらに、センチニクバエの体液細胞の膜分画中に存在する、脂肪体を攻撃する因子の精製を試みた結果、これも完全精製に成功した。その結果、この因子は200kDaのたんぱく質であることが確認された。その他、腫瘍変性因子、ウサギ血清中の増殖阻害因子などについての精製も進んだ。
つぎに、生物活性についてであるが、各因子の作用機構について多くのことが解明された。腫瘍変性因子の作用機構について、TNFとさまざまな点について比較しながら検討した結果、TNFとは異なる機構により腫瘍細胞の変性が起こることが明らかになった。また、ChM-1は血管内皮細胞の増殖を抑制すること、腫瘍退縮因子は、同じく血管内皮細胞の増殖を抑制するが、その際腫瘍退縮因子により好中球が血管内皮細胞へ接着するのを高めることなどが示唆された。さらに、マウス脳由来抗がん因子(NBCF)、グリア細胞成長因子(GMF)などの因子について、その抗腫瘍作用機構が解析された。

研究成果

• [文献書誌] 今西 二郎: "抗腫瘍性サイトカイン" 日本臨牀. 50. 45-49 (1992)
• [文献書誌] F.Suzuki: "Molecular cloning of a new class of cartilage-specific matrix,chondromodulin-I,which stimulates growth of cultured chondrocytes" Biochem.Biophys.Res.Commun.175. 971-977 (1991)
• [文献書誌] F.Suzuki: "A clonal human chondrosarcoma cell line produces an anti-angiogenic antitumor factor" Anticancer Res.10. 311-316 (1990)
• [文献書誌] S.Natori: "The 29-kDa hemocyte proteinase dissociates fat body at metamorphosis of sarcophaga" Dev.Biol.153. 115-121 (1992)
• [文献書誌] S.Natori: "Purification of a 29-kDa hemocyte proteinase of Sarcophage peregrina" Eur.J.Biochem.204. 911-914 (1992)
• [文献書誌] S.Natori: "Purification of the 200-kDa hemocyte membrane protein of Sarcophaga peregrina and its specific interaction with fat body" Insect Biochem.21. 517-522 (1991)
• [文献書誌] S.Natori: "Participation of a 200-kDa hemocyte membrane protein in the dissociation of the fat body at the metamorphosis of sarcophaga" Dev.Biol.146. 179-185 (1991)
• [文献書誌] S.Natori: "Participation of hemocyte proteinase in dissociation of the fat body on pupation of Sarcophage peregrina(Flesh fly)" Insect Biochem.20. 461-465 (1990)
• [文献書誌] K.Nishikawa: "Roles of various growth factors in growth of human osteosarcoma cells which can grow in protein-free medium" Cell Stract.Funct.17. 9-17 (1992)
• [文献書誌] K.Nishikawa: "Direct effect of basic fibroblast growth factor on gene transcription in a cell-free system" Proc.Natl.Acad.Sci.USA. 89. 5216-5220 (1992)
• [文献書誌] K.Nishikawa: "Distribution of fibroblast growth factors in cultured tumor cells and their transplants" In Vitro Cell.Dev.Biol.28A. 419-428 (1992)
• [文献書誌] K.Nishikawa: "Species-specific differences in the mitogenic activity of heparin-binding growth factors in the sera of various mammals" Exp.48. 239-245 (1992)
• [文献書誌] K.Nishidawa: "Localization of basic fibroblast growth factor(bFGF)in a metastatic cell line(AT-3)established from the dunning prostatic carcinoma of rat:Application of a specific monoclonal antibody" Ady.Exp.Med.Biol.324. 131-139 (1992)
• [文献書誌] 武田 健: "分化誘導促進因子ーTNFの骨髄性白血病細胞分化誘導作用ー" 造血因子. 2. 25-31 (1992)
• [文献書誌] 武田 健: "TNFとリンフォトキシンー構造と作用の違いとレセプターー" 医学のあゆみ 別冊 サイトカインー基礎から臨床応用までー. 66-70 (1992)
• [文献書誌] K.Takeda: "Retinoic acid enhances induction of manganese superoxide dismutase activity in a human normal embryonic lung fibroblast cell line,TIG-3" OXYGEN RADICALS. 811-814 (1992)
• [文献書誌] 三羽 信比古: "悩神経系のプログラム細胞死と新生期悩由来抗癌因子NBCF:キラー蛋白質による細胞死の機序と生理的役割" 生物物理. 32. 135-140 (1992)
• [文献書誌] K.Miyazaki: "Induction of 103-kDa gelatinase/type IV collagenase by acidic culture conditions in mouse metastatic melanoma cell lines" J.Biol.Chem.267. 11424-11430 (1992)
• [文献書誌] K.Miyazaki: "Multiple secretion of matriz serine proteinases by human gastric carcinoma cell lines" Cancer Res.52. 5046-5053 (1992)
• [文献書誌] K.Miyazaki: "Activation of TIMP-2/Progelatinase a complex by stromelysen" Biochem.Biophys.Res.Commun.185. 852-859 (1992)
• [文献書誌] K.Miyazaki: "In vivo Anti-tumor activity of arginine deiminase purified from Mycoplasma arginini" Int.J.Cancer.51. 244-249 (1992)
• [文献書誌] K.Miyazaki: "Purification and partial characterization of two types of growth-inhibitory protein latently present in rabbit serum" Biochim.Biophys.Acta. 1118. 239-248 (1992)
• [文献書誌] Y.Hitoshi: "Differential regulation of lgA production by TGF-β and IL-5:TGF-β induces surface lgA-positive cells bearing IL-5 receptor,whereas IL-5 promotes their survival and maturation into lgA-Secreting" Cell.Immunol.140. 158-172 (1992)
• [文献書誌] Y.Hitoshi: "Coexpression of CD5 and IL-5 receptor on peritoneal B cells" Ann.N.Y.Acad.Sci. 651. 261-263 (1992)
• [文献書誌] Y.Hitoshi: "Cytokine receptors on Ly-1 B cells" Ann.N.Y.Acad.Sci.651. 241-258 (1992)
• [文献書誌] 今西 二郎 編: "がん対する生体防御機構 非免疫系抗腫瘍性因子を中心としてー" 共和書院, 171 (1993)