核酸分解酵素の遺伝的多型を利用した膵臓癌診断法の開発

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04152052
• 研究機関: 福井医科大学
• 研究代表者: 岸 紘一郎 福井医科大学, 医学部, 教授 (30169841)
• 研究分担者: 灘野 大太 福井医科大学, 医学部, 助手 (00228074) ; 安田 年博 福井医科大学, 医学部, 助教授 (80175645)
• キーワード: DNase / RNase / 遺伝的多型 / 膵臓がん / 体内分布 / 遺伝マーカー / 診断マーカー

研究概要

ヒトDNase I[EC3.1.21.1]の体内分布を調査したところ、臓器では、膵ついで肝、腎に、体液では、尿ついで精液、唾液に活性がこいことが知られた。ポリアクリルアミドゲル等電点電気泳動(IEF-PAGE)によってDNaseやRNaseのアイソザイムを分析する際に有用な高感度活性染色法、dried agarose film overlay (DAFO)を開発した。IEF-PAGEとDAFO法とによって、ヒト精液のDNase Iアイソザイムを分析して、遺伝的多型が認められることを明らかにした。化学合成されたペプチドに対する抗体がヒトのDNase IやRNaseのアイソザイム分析に有効であることを明らかにするとともに、これらの抗体の生化学的性状をも明らかにした。ヒトDNase II[EC3.1.22.1]の尿からの精製法や高感度活性測定法single radial enzyme-diffusion(SRED)法を確立し、その蛋白質化学的、酵素学的及び免疫学的性状を明らかにした。さらに、ヒト体内におけるDNase IIの分布を調査し、この酵素はDNase Iとちがって臓器中に一様に分布していることを報告した。ヒト尿や白血球のDNase IIの酵素活性をSRED法によって測定すると、各個人間に強弱が認められるが、DNase II活性の強弱は常染色体上の優劣のある一対の対立遺伝子によって支配されていることをつきとめた。内科系疾患に罹患している患者のDNase I型を検査し、統計学的に比較すると膵肝疾患群では、健常者群に比して1型と2型のrelative risk値が高く、消化管疾患群では異型接合体のprotection effectが高いことがわかった。

研究成果

• [文献書誌] YASUDA,Toshihiro: "Human urine deoxyribonuclease II (DNase II) esoenzymes" Biochimica Biophysica Acta. 1119. 185-193 (1992)
• [文献書誌] YASUDA,Toshihiro: "Genetic polymorphism of human deoxyribonuclease II" Annals of Human Genetics. 56. 1-10 (1992)
• [文献書誌] YASUDA,Toshihiro: "Discovery of a genetic polymorphism of fuman plasma protein C inhibitor (OCI)" Human Genetics. 89. 265-269 (1992)
• [文献書誌] YASUDA,Toshihiro: "Specific identification of human ribonucleases by antibod produced against two synthetic peptides corresponding to the N-and C-terminal amino acid seguences of human urina secretory-type ribonuclease" Biochimica Biophysica Acta. 1121. 331-334 (1992)
• [文献書誌] SAWAZAKI,Kazumi: "Transferrin (TF) typing from semen stains using isoelectric focusing and immunoblotting" Journal of Forensic Sciences. 37. 1514-1524 (1992)
• [文献書誌] YASUDA,Toshihiro: "the zymogram method for detection of ribonucleases after isoelectric focusing" Analytical Biochemistry. 206. 172-177 (1992)
• [文献書誌] SAWAZAKI,Kazumi: "A new individualization marker of semen" Forensic Science International. 57. 39-44 (1992)
• [文献書誌] KOMINATO,Yoshihiko: "Heterogeneous expression of blood group A-determinant in human gastric cancer cell line dereved from blood group A individual" European Journal of Immunogenetics. 19. 1-9 (1992)
• [文献書誌] YASUDA,Toshihiro: "Postmoetem concentrations of thiopental in tissues" International Journal of Legal Medicine. 105. 239-241 (1993)
• [文献書誌] NADANO,Daita: "Measurement of deoxyribonuclease I activity in human tissues and body fluids by a single radial enzymediffusion method" Clinical Chemistry. (1993)
• [文献書誌] YASUDA,Toshihiro: "Survey on the association of deoxyribonuclease I (DNase I) polymorphism with disease" Human Heredity. (1993)
• [文献書誌] SAWAZAKI,Kazumi: "Deoxyribonuclease I (DNase I) typing from semen stains:low enzyme activity in vaginal fluids does not interfore with seminal DNase I typing from mixture stains" Jouxnal of Forensic Sciences. (1993)
• [文献書誌] YASUDA,Toshihiro: "核酸分解酵素の遺伝的多型を指標にした膵臓がんの早期診断法の開発" 成人病の研究. 11. 4-5 (1992)
• [文献書誌] YASUDA,Toshihiro: "エンドヌクレアーゼアイソザイムの高感度活性染色法 ーdried agarose film overlay (DAFO)法のDNase,RNaseアイリザイムノ生化学分析への応用ー" 生化学. 65. 39-42 (1993)
• [文献書誌] SAWAZAKI,Kazumi: "ペルオキシダーゼ標識抗体によるアガロースゲル中の免疫沈降物の増感法:ロケット免疫泳動法による尿トランスフェリンの定量" 科学警察研究所報告 法科学編. (1993)