マウス胚保未分化細胞での効率より遺伝子トラップ法の開発

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04206207
• 研究機関: 理化学研究所
• 研究代表者: 相沢 慎一 理科学研究所, 分子腫疫, 副主任研究員 (60073011)
• キーワード: ES細胞 / ジーントラップ / 神経発生 / PCR / 5'-RACE / 3'-RACE

研究概要

マウス変異ES細胞ライブラリーの作成を念傾にES細胞でのジーントラップ法の開発を行った。
(1)マーカー遺伝子導入体の中でジーントラップを起していないものの頻度を減少させるためのメガティブ選別ベッターの開発を行い、ポリAゲット等によりその頻度を40%に高めることが出来た。
(2)マーカー遺伝子としてのβ-Galの発型特異性を指標に神経系で特異的に発現するジーントラップクローンの同定を進めた。同定したクローンについては子孫マウスを作成し、また5'RACE法による押入部位遺伝子産物の同定を行った。
(3)マーカー遺伝子導入体中でのジーントラップ体を3'RAEE法により富便に同定し得ることを明らかにした。本法によればマーカー遺伝子の発現検索によらずジーントラップ体をES細胞の段階で同定し得る。同定したクローンについて子孫マウスの作成、遺分子構造の氾守を行った。

研究成果

• [文献書誌] Fruta,Y.et al: "Degeueaten of skeletal and caideac muscle in c-uhb tuceussence wice" Teusgenie Reseaid.
• [文献書誌] Fictay Y,dt al: "Preloukewic byperplonyeration of tuilieeage eewatopaietic cells in tuensgenic wice" Sep,Hewatal.
• [文献書誌] Haita,K,et al: "A Nouce tuossne kinase,bye,eepressol in muine enbreonie stom calls," Bioclem Bioply Res Gmmen.189. 1747-1753 (1982)
• [文献書誌] Saga,Y,et al: "Mice liuelop nounally without teuascin." Genes & doi. 6. 1821-1833 (1992)
• [文献書誌] Hivabayshi,Y,et al: "Hemotopoietic ueoplasms in lettally insadiatod mice vepopulated with" Sep,Heuatol. 20. 167-172 (1992)