免疫系担当細胞の発生の分化に関与するリンホカイン及びその受容体の解析

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04253212
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 高津 聖志 東京大学, 医科学研究所, 教授 (10107055)
• 研究分担者: 高木 智 東京大学, 医科学研究所, 教務職員 (10242116) ; 片桐 拓也 東京大学, 医科学研究所, 助手 (70126100)
• キーワード: IL-5 / ヒトIL-5受容体 / IL-3受容体 / GM-CSF受容体 / チロシンリン酸化 / シグナル伝達

研究概要

(a)マウスIL-5受容体α鎖およびβ鎖をIL-2依存性株化細胞に発現させβ鎖のシグナル伝達における役割を解析した。α鎖とβ鎖をともに発現したトランスフェグタントはIL-5に対する応答性を獲得して増殖したが、α鎖単独あるいはβ鎖単独ではIL-5には応答しなかった。つまりβ鎖がシグナル伝達因子として必須であることがわかる。同じ考え方がヒトIL-5受容体でも成りたつか調べるために、ヒトIL-5受容体の鎖とβ鎖KH97分子をトランスフェクションして調べたところ、やはりα鎖、β鎖をともに発現させた場合にのみIL-5応答性を獲得した。ヒトとマウスのIL-5受容体系の違いは、ヒトIL-5受容体α鎖はそれ単独で高親和性でIL-5と結合できるが、マウスIL-5受容体α鎖は低親和性でしかIL-5と結合できずβ鎖の関与を必要とすることである。いづれの場合もβ鎖はシグナル伝達分子として必須である。(b)IL-5受容体α鎖のシグナル伝達における役割を解析するため、細胞質内を欠失したα鎖遺伝子をトランスフェクトした調べたところ、α鎖を欠失したものと同様、細胞質内を欠失したα鎖はIL-5とは結合できても、IL-5シグナルの伝達はできなかった。このことよりα鎖の細胞質内ドメインがβ鎖との会合や、シグナル伝達系との会合に必須であることがわかった。(c)IL-5応答細胞をIL-5で刺激すると短時間(5分以内)に4種類の異なるタンパク質のチロシン残基のリン酸化がおこる。このリン酸化をHerbimycineで阻害するとIL-5応答性を失うことからチロシン残基のリン酸化がIL-5シグナルの伝達に重要であることがわかった。IL-5受容体β鎖のリン酸化がIL-5シグナルの伝達に重要であるか調べるため、IL-5に応答してβ鎖のリン酸化がおこるか調べた。IL-5利淑後すみやかなリン酸化がみられた。現在その生理的意義を解析するために、変異β鎖を発現させ検討している。

研究成果

• [文献書誌] Yoshiyuki Murata et al.: "Molecular cloning and characterization of the human interleukin 5 receptor" Journal of Experimental Medicine. 175. 341-351 (1992)
• [文献書誌] Kiyoshi Takatsu: "Interleukin-5" Current Opinion of Immunology. 4. 299-305 (1992)
• [文献書誌] Satoshi Takaki et al.: "Reconstitution of the functional receptors for murine and human interleukin 5" Journal of Experimental Medicine. 176. (1993)
• [文献書誌] Yasumichi Hitoshi et al.: "Interleukin 5 receptor positive B cells,but not Cosinophils are functionally and numerically influenal in the mice carrying the X-linked immune defeit" International Immunology. 6. (1993)
• [文献書誌] Yasumichi Hitoshi et al.: "Delayed progression of a murine retro-virus-induced acquired immunodeficiency syndronie,MAIDS in X-linked immunodeficient mice" Journal of Experimental Medicine. 176. (1993)
• [文献書誌] Shigeki Katoh et al.: "Characterization of a CD5^+B cells maintained in IL-5 tianugenic mice:Pdyreactive sutoautibody production and immunoglovulin productinl and immcuoglogulin glne usage." DNA and Genes. (1993)