がん関連遺伝子による癌診断

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04253234
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: 珠玖 洋 長崎大学, 医学部, 教授 (80154194)
• 研究分担者: 古川 鋼一 長崎大学, 医学部, 助教授 (80211530)
• キーワード: nm23 / NDPkinase / リンパ節転移 / ガングリオシド / β1,4N-acelylgalactosamingltransferase

研究概要

nm23/NDPKinasa遺伝子およびB1,4N-acetylgctosaminyltransferase遺伝子の解析をおこなった。nm23/NDPKinase遺伝子
(1)nm23-H_1およびH_2分子の各々に特異的なモノクローナル抗体を作製した。これらのモノクロール坑体およびDNAprcbeを用いて、ヒト乳癌においてはnm23-H_1分子の発現がリンパ節転移の頻度に逆相関しまた、予後との間にも明らかな逆相関があることをまた大腸癌症例においては、nm23-H_1遺伝子の発現は、その肝転移の頻度と逆相関することを示した。
(2)nm23-H_1およびH_2分子は、従来考えられていた細胞内のみならず、多くの細胞の細胞表面にも認められ、さらに、細胞培養液中およびヒト血清中にも存在することを明らかにした。細胞外に認められるnm23/NDPkinase分子は、細胞内に存在するものと同様、NDPkinase活性を有している。
(3)ヒトnm23-H_1およびマウスnm23-M_1のgenomicDNAを単離し、exonintran構造を明らかにした。また、nm23-M_2のcDNAを単離し、その全塩基配列を決定した。
β1,4N-acetylgalactosaminyltransferase遺伝子
(1)β1,4N-acetylgalactosaminyltransferasecDNAの膜貫通部位より3側に存在する酵素のcatalyticdomainとproteinAとの融分タンパクを合成するためのconstructを作製し、マウスB_<16>細胞にトランスフェクトした後の培養上清中の酵素活性を測定した。この融合タンパクによる酵素の基質特異性を検討した。
(2)本酵素のヒトgenomic遺伝子を単離し、全体で11exonより成り立ち、約10kbにわたっていることを明らかにした。現在、5側の発現調節領域については解析中である。

研究成果

• [文献書誌] Sohda,Y.,et al.: "Kimase group proto-oncogenes in non-Hodgkin's lymphomas and non-malignant lymphoid tissues:analysis of their expression by in situ hybridization assays" Int.J.Oncol.1. 257-264 (1992)
• [文献書誌] Utsno,T.,et al.: "Human nm23-H1 and H2 proteins have similar nucleoside diphosphate kinase activities" Int.J.Oncol. 1. 425-430 (1992)
• [文献書誌] Urano,T.,et al.: "Molecular cloning and functional expression of the second mouse nm23/NDP kinase gene,nm23-M2" FEBS Letters. 309. 358-362 (1992)
• [文献書誌] Nagata,Y.,et al.: "Expression cloning of β1,4 N-acetylgalactosaminyltrans-ferase cDNAs that determine the expression of GM2 and GD2 gangliosides" J.Biol.Chem.267. 12082-12089 (1992)
• [文献書誌] Urauo,T.,et al.: "Expression of nm23/NDP kinase proteins on the cell surface" Oncogene.
• [文献書誌] Furukawa,K.,et al.: "GD2 ganglioside on human T-lymphotropic virus type I-infected cells:Possible activation of β1,4-N-acetyl-galactosaminyltransferase gene by p40tax" Proc.Natl.Acad.Sci.USA.