1992 年度実績報告書

微生物由来がん遺伝子機能抑制物質の研究

研究課題

研究課題/領域番号	04253243
研究機関	国立予防衛生研究所
研究代表者	上原至雅国立予防衛生研究所, 生物活性物質部, 室長 (50160213)
研究分担者	水野左敏国立予研, 生物活性物質部, 部長 (60072930) 村上裕子国立予研, 生物活性物質部, 主任研究官 (00142133) 深澤秀輔国立予研, 生物活性物質部, 研究員 (10218878)
キーワード	がん遺伝子 / チロシンキナーゼ / ハービマイシン / プロテインキナーゼ / 阻害剤 / スクリーニング
研究概要	(a)ハービマイシンの作用に関する研究:[^<14>C]ハービマイシンを調整し、v-Src蛋白のキナーゼ領域への結合を証明すると共に、結合によりチロシンキナーゼが失活する機構(ATPの結合阻止)を明らかにした。また、ヒトBCR/ABL遺伝子を導入したマウス骨随細胞と各種ヒト白血病細胞のハービマイシンに対する感受性の比較から、BCR/ABLチロシンキナーゼが抗がんの標的になることを示した。ハービマイシンはp210^<bcr/abl>チロシンキナーゼをv-Ablやv-Srcチロシンキナーゼをより強く抑制するが、EGFレセプターのチロシンキナーゼは阻害しないことから、ハービマイシン結合ドメイン構造の相違が考えられた。 (b)新規がん遺伝子機能抑制物質の探索研究:増殖因子要求性を指標とした検索系を確立し微生物代謝産物中に探索を行ない、Src,Ablトランスフォーマントで活性を示した新規物質YU-6247(仮名、アンスラキノン構造)を得た。本物質はSrcチロシンキナーゼをin vitroで阻害したので、新規チロシンキナーゼ阻害剤と結論された。 (c)プロテインキナーゼ抑制物質の新しい活性評価系:PKA、PKC、PTK、CaMKIIIの4種類のプロテインキナーゼ活性を同時に検出できる系を確立した。市販の阻害剤の作用の検討から、この系が選択性の高いプロテインキナーゼ阻害剤の効率的なスクリーニング系として有用である可能性が示された。

研究成果

(12件)

すべてその他

すべて文献書誌 (12件)

[文献書誌] J. Mizuguchi: "Tyrosine protein kenase is involved in anti-lgM-mediated signaling in BAL17 B lymphoma cells." J. Immunol.148. 689-694 (1992)
[文献書誌] T. Satoh: "Inhibiton of interleukin 3 and granulocyte-macrophage colony stimulating factor stimulated increase of active Ras GTP by herbimycim A,a specific inhibitor of tyrosine kinases." J. BIol,Chem.267. 2537-2541 (1992)
[文献書誌] T. Iwasaki: "Herbimycin A blocks lL-1-induced NF-κB DNA-binding activity in lymphoid cell lines." FEBS Lett.298. 240-244 (1992)
[文献書誌] K, Katugiri: "Modulation of monocytic differentiation of HL-60 cells by inhibitors of protein tyrosine kinases." Cell. Immunol.140. 282-294 (1992)
[文献書誌] K,Takahashi: "Growth inhibiton by anchorage-deficiency is associated with increased level but reduced phosphorylation of mutant P53." Jpn.J.Caner Res.83. 385-365 (1992)
[文献書誌] M,Okabe: "Effect of herbimycin A, an antagonist of tyrosine kinase, on <bcr/abl>^^^- oncoprotein-associated cell proliferation: abrogative effect on the transformation of murine hematopoietic cells by transfection of a retroviral vector expressing oncoprotein p210^<bcr/abl> and preferential inhibition on Ph^1-positive leukemia cell growth." Blood. 80. 1330-1338 (1992)
[文献書誌] M,Shibata: "Identification of a 64-KDa protein phosphorylated with glucose in human polymorphomuclear leukocytes in cell free system." Immnol,Lett.32. 215-222 (1992)
[文献書誌] K,Suzuki: "Bioimaging of myeloperoxidase release into phagolysosome of viable polymorphonuclear leukocytes and reaction of the enzyme with microspheres using a highly sensitive analyzer system, IMARS." Bioimages. (1993)
[文献書誌] T,Yoneda: "Herbimycin A, a pp60^<c-src> tyrosine kinase inhibitor, inhibits osteoclastic bone resoption in vitro and hypercalcemia in vivo." J,Clin.Invest.(1993)
[文献書誌] P-M.Li: "Method of indetifying inhibitors of oncogenic transformation: selective inhibition of cell growth in serum-free medium." Oncogene. (1993)
[文献書誌] 上原至雅: "腫瘍遺伝子産物と癌化学療法" 化学療法・領域. 9. 245-251 (1993)
[文献書誌] 上原至雅: "癌遺伝子およびその産物と化学療法" 図説臨床「癌」シリーズ新版「癌化学療法の進歩」. 1. 31-37 (1993)

1992 年度 実績報告書

微生物由来がん遺伝子機能抑制物質の研究

研究代表者

上原 至雅 国立予防衛生研究所, 生物活性物質部, 室長 (50160213)

研究成果

[文献書誌] J. Mizuguchi: "Tyrosine protein kenase is involved in anti-lgM-mediated signaling in BAL17 B lymphoma cells." J. Immunol.148. 689-694 (1992)

[文献書誌] T. Satoh: "Inhibiton of interleukin 3 and granulocyte-macrophage colony stimulating factor stimulated increase of active Ras GTP by herbimycim A,a specific inhibitor of tyrosine kinases." J. BIol,Chem.267. 2537-2541 (1992)

[文献書誌] T. Iwasaki: "Herbimycin A blocks lL-1-induced NF-κB DNA-binding activity in lymphoid cell lines." FEBS Lett.298. 240-244 (1992)

[文献書誌] K, Katugiri: "Modulation of monocytic differentiation of HL-60 cells by inhibitors of protein tyrosine kinases." Cell. Immunol.140. 282-294 (1992)

[文献書誌] K,Takahashi: "Growth inhibiton by anchorage-deficiency is associated with increased level but reduced phosphorylation of mutant P53." Jpn.J.Caner Res.83. 385-365 (1992)

[文献書誌] M,Shibata: "Identification of a 64-KDa protein phosphorylated with glucose in human polymorphomuclear leukocytes in cell free system." Immnol,Lett.32. 215-222 (1992)

[文献書誌] K,Suzuki: "Bioimaging of myeloperoxidase release into phagolysosome of viable polymorphonuclear leukocytes and reaction of the enzyme with microspheres using a highly sensitive analyzer system, IMARS." Bioimages. (1993)

[文献書誌] T,Yoneda: "Herbimycin A, a pp60^<c-src> tyrosine kinase inhibitor, inhibits osteoclastic bone resoption in vitro and hypercalcemia in vivo." J,Clin.Invest.(1993)

[文献書誌] P-M.Li: "Method of indetifying inhibitors of oncogenic transformation: selective inhibition of cell growth in serum-free medium." Oncogene. (1993)

[文献書誌] 上原 至雅: "腫瘍遺伝子産物と癌化学療法" 化学療法・領域. 9. 245-251 (1993)

[文献書誌] 上原 至雅: "癌遺伝子およびその産物と化学療法" 図説臨床「癌」シリーズ新版「癌化学療法の進歩」. 1. 31-37 (1993)

1992 年度実績報告書

上原至雅国立予防衛生研究所, 生物活性物質部, 室長 (50160213)

[文献書誌] 上原至雅: "腫瘍遺伝子産物と癌化学療法" 化学療法・領域. 9. 245-251 (1993)

[文献書誌] 上原至雅: "癌遺伝子およびその産物と化学療法" 図説臨床「癌」シリーズ新版「癌化学療法の進歩」. 1. 31-37 (1993)