分裂酵母AP-1様転写因子papl^+の構造・機能解析

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04254208
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 登田 隆 京都大学, 理学部, 講師 (50197894)
• キーワード: 転写因子 / 分裂酵母 / クロマチン / ロイシンジッパー / 核蛋白質 / AP-1配列 / リン酸化蛋白質 / 分子生物学

研究概要

分裂酵母papl蛋白質は、7残基毎にロイシンが5回繰り返し、さらにその直前に塩基性アミノ酸に富む領域が存在する“ロイシンジッパー"構造をもつ。544アミノ酸よりなる蛋白質で、細胞内では電子量75kdのリン酸化蛋白質として存在している。大腸菌で産生させた2種類の融合papl蛋白質(50kdのpap50と7kdのpap7:後者は阪大、蛋白研の白川、京極両博士、阪大、薬学部、箱島博士との共同研究)は、in vitoでAP-1配列(TTIG AGTCA)に特異的に給合することが示された。さらに溶液中でpapl蛋白質は二量体で存在する。今回、paplのターゲット置伝子の1つp25(25kdの蛋白質をコードする)を同定した。papl置伝子の過剰発現により細胞内P25蛋白質及びmRNA量は少なくても数倍上昇した。逆にpapl破壊欠損細胞ではP25の発現は全くみられなかった。置伝学的解析から、p25は核蛋白質crml変異細胞で大量に蓄積することが知られていた。今回我々は、crml変異細胞でp25蛋白質が蓄積するのは、popl依存性の現象であり、しかもpapl欠存がcrml変異を抑制することを見い出した。すなわち、crmlはpapl転写因子を員に制御する新しい核蛋白であることが示された。crml変異ではp25蛋白質蓄積のみならず、クロマチン構造が大きく変化する。従って転写因子paplは、真核生物のクロマチン構造権持にも重要な役割を果すことが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Todo,T.Shimanuk,M.Saka,Y.Yamano,H.Adachi,Y.Shimanvki,M.Kyogoku,Y.& Yanagida,M.: "Fission yeast papl-dependent transcription is negatively regulated by an essential nuclear protein,crml." Mol.Cell.Biol.12. 5474-5484 (1992)
• [文献書誌] Kinoghita.N.,Yamano.H.,Le Barthant-Siadcczek.F.,Kurooka.M.tode,T.Yoshida,I.Yunagida,M.: "Sister-chromatide separation and protein dephosphorylation in mitosis." In Cold Spring Harbor Symposia on Quantitative Biology,. LV1. 621-628 (1992)
• [文献書誌] Hagan,I.,and Tlda,T.: "A new axis for cell division." Trends in Cell Biol.2. 245-246 (1992)
• [文献書誌] Shimanvki,M.,Goebl,M.,Yanagida,M.& Toda,T.: "Thefission yeast stsl gene encodes a protein similar to the chicekn lamin B receptor and is implicated in pleiotropic drug-sensitivity,divalent cation-sensitivity and osmoregulation." Mol.Biol.Cell. 3. 263-273 (1992)
• [文献書誌] Toda,T.,Shimanuki,M.& Yanagida,M.: "Fission yeast genes that confer resistance to staurosporine encode an AP-1-like transcription factor and a protein kinase related to the mammalian ERKI/MAP2 and budding yeast FUS3 and KSS1 kinases.Genes Dev.5,60-73." Genes Dev.5. 60-73 (1991)
• [文献書誌] Toda,T.,Shimanuki,M.& Yanagida,M.: "The fission yeast papl+gene encodes an AP-1-like factor tha functionally interacts with a novel protein kinase." J.Cell Biochem.suppl.14B. 149-149 (1990)