老化脳における神経栄養因子の濃度とその調節機構に関する研究

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04268220
• 研究機関: 愛知県心身障害者コロニー発達障害研究所
• 研究代表者: 仙波 りつ子 愛知県心身障害者コロニー発達障害研究所, 周生期学部, 主任研究員 (80100163)
• キーワード: 神経成長因子 / 老化 / 脳 / 酵素免疫測定法 / NADHサイクリング / ラット / マウス

研究概要

脳における神経栄養因子の濃度が、神経細胞の生存を左右し、老化脳にみられる神経細胞の変性、脱落を起こすか否かを明らかにするため、本年度は、神経成長因子(NGF)の測定系を用いて以下の実験を試みた。
1.脳のどの部位に、NGF濃度の加齢変化があらわれるかを明らかにするため、まず、ラットおよびマウスを用いて、脳の各部位のNGF含量を酵素免疫測定法により測定した。この結果、海馬のNGF含量が老齢ラットで低下していた。この低下は、雌で非常に顕著であった。一方、マウスでは、NGF含量に雌雄差のみられる部位があったが、少なくとも、生後一年までは加齢にともなうNGF含量の変化は観察されなかった。
2.記憶障害を持つ老化促進マウスでは、海馬および大脳皮質のNGF含量が、対照群でも老化促進マウスでも8カ月齢で急激に減少していた。しかしながら、老化促進マウスのNGF含量は、対照群に比べ高い値を示した。この結果から、老化促進マウスの老化は自然老化とは状況が少し異なること、NGF含量の変化には系統差のあることが示唆された。
3.脳の部位を用いたNGF含量の検索では、老化とNGF含量の間に必ずしも一定の関係が得られなかったので、神経細胞のNGF含量の測定を計画した。まず、NGF測定の感度上昇をはかるため、高感度酵素免疫測定法とNADHサイクリング法を組み合わせ、54x10^<-18>モルのNGFを2.5X10^<-9>モルまで増幅できた。
以上の結果から、老化と神経栄養因子の濃度との関連を深るには、神経細胞の神経栄養因子の含量せ測定することが必要であること、高感度酵素免疫測定法とNADHサイクリング法を組み合わせることにより、それが可能になることが明らかになった。

研究成果

• [文献書誌] Shozuhara, H.: "Temporal profiles of nerve growth factor β-subunit level in rat brain regions after transient ischemia." Journal of Neurochemistry. 59. 175-180 (1992)
• [文献書誌] Katoh-Semba, R.: "Nerve growth factor-induced changes in the structure of sulfated proteoglycans in PC12 Pheochromocytoma cells." Journal of Neurochemistry. 59. 282-289 (1992)
• [文献書誌] 仙波 りつ子: "脳可溶性コンドロイチン硫酸プロテオグリカンによるPC12細胞の増殖および突起形成阻害:細胞環境の影響" 神経化学. 31. 356-357 (1992)
• [文献書誌] Katoh-Semba, R.: "Core proteins of soluble chondroitin sulfate proteoglycans purified from the rat brain block the cell cycle of PC12D cells." Journal of Cellular Physiology. (1993)
• [文献書誌] Katoh-Semba, R.: "An acceleration of age-related increases in levels of the β-subunit of nerve growth factor in selected tissues from senescence accelerated mice (SAM-P/8)." Journal of Molecular Neuroscience. (1993)
• [文献書誌] Katoh-Semba, R.(分担執筆): "Neurotrophic Factors (pp.185-196)" Japan Scientific Societies Press, Tokyo, 242 (1992)