リヴァースジェネティックスによるハンチントン病の異常遺伝子産物の同定

1994 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04404041
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 金澤 一郎 東京大学, 医学部(医), 教授 (30110498)
• キーワード: ハンチントン病 / DNAマーカー / 第4染色体 / CAGリピート

研究概要

ハンチントン病は、中年以降に出現する舞踏運動、知能障害を臨床的特徴とする常染色体性優性遺伝する遺伝性神経変性疾患である。1983年に米国グゼラ博士らはDNAマーカーとの遺伝子連鎖の研究から、この異常遺伝子が第4染色体短腕先端部に局在することを発見した。そこで我々はグゼラ博士との共同研究によって、著しく頻度が少ない我が国のハンチントン病が、はたして遺伝子的に欧米のそれと同一である否かを検討した。その結果、我が国のハンチントン病も欧米と同じ遺伝子によると考えられることを見出すと同時に、本症の遺伝子座が4p16.3領域のうちのやや中心体寄りに位置することを見出した。1993年3月には、グゼラ博士らは本症の異常遺伝子を特定することに成功し、これをIT15遺伝子と名付けた。これは正常でも5'端に10〜25個程度のCAGリピートをもち、ハンチントン病では、これが40個以上に伸長していた。なお、このIT15のCAGリピートの直後に7または10個のプロリンストレッチが続いている。我々は現在までに収集した本邦のハンチントン病約60家系のサンプルについて改良PCR法によってIT15遺伝子のCAGリピート数を実測し、発病年令との関係、プロリンストレッチ多型との連鎖不平衡の有無、などについて検討した。その結果、発病と連鎖するプロリン多型が欧米では7個であるとされているのに対して、本邦の発病者の多くは10個であることを見出し、本邦のハンチントン病の起源が必ずしも欧米と同じではないことを意味する。さらに、IT15遺伝子の塩基組成から予想されるペプチドに対する特異抗体を作成し、リンパ球と脳から抽出した蛋白分画を用いたウェスタン解析を行なったところ、正常のIT15蛋白(約350kD)の他に、発病者のみで約400〜450kD程度の大きさのバンドを検出できた。すなわち、本症での異常遺伝子産物が生成されていることを証明できた。

研究成果

• [文献書誌] Nagafuchi S.,Yanagisawa H.,Sato K.,Shirayama T.,Ohsaki E.,: "Dentatorubral and pallidoluysian atrophy expansion of an unstable CAG trinucleotide on chromosome 12p." Nature Genetics. 6. 14-18 (1994)
• [文献書誌] Kanazawa I: "Diagnosis and genetic counseling for Huntington's disease." Intractable Neurological Disorders,Human Genome Research and Society;Proceeding of the Third International Bioethics Seminar in Fukui. 75-76 (1994)
• [文献書誌] 後藤順,金澤一郎: "ハンチントン病/Huntington's disease" 実験医学. 12(増刊). 720-724 (1994)
• [文献書誌] Toda T,Ikegawa S,Okui K,Kondo E,Saito K,Fukuyama Y,: "Refined mapping of a gene responsible for Fukuyama-type congenital muscular dystrophy:Evidence for strong linkage disequilibrium." Am J Hum Genet. 55. 946-950 (1994)
• [文献書誌] Squitieri F,Andrew SE,Goodberg YP,Kremer B,: "DNA haplotype analysis of Huntington disease reveals clues to the origins and mechanisms of CAG expansion and reasons for geographic variations of prevalence." Human Molecular Genetics. 3. 2103-2114 (1994)
• [文献書誌] Hadano S.,Ishida Y.,Bates GP.,Nagayama T.,Kanazawa I.,: "Generation of high-density DNA markers from yeast artificial chromosome DNA by single unique primer-polymerase chain reaction." GATA. 10. 105-108 (1993)