動物の造血器腫瘍における癌遺伝子と癌抑制遺伝子の異常

1993 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04454121
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 辻本 元 東京大学, 農学部, 助教授 (60163804)
• 研究分担者: 小野 憲一郎 東京大学, 農学部, 教授 (50111480) ; 亘 敏広 東京大学, 農学部, 助手 (50220950) ; 後飯塚 僚 東京大学, 農学部, 助手 (60205581) ; 長谷川 篤彦 東京大学, 農学部, 教授 (90011923)
• キーワード: 造血器腫瘍 / 白血病 / リンパ腫 / イヌ / ネコ / 癌遺伝子 / 癌抑制遺伝子

研究概要

造血器腫瘍発症の分子機構を解明するため、動物に自然発生するリンパ腫、白血病における癌遺伝子および癌抑制遺伝子の異常を解析した。
昨年度、クローニングしたネコp53遺伝子については、新たに全翻訳領域(386アミノ酸)を含むcDNAを単離し、また染色体マッピングの結果、ネコE1染色体に存在することが明らかとなった。13例のネコの造血器腫瘍についてp53遺伝子cDNAをPCR-SSCP(single-strand conformation polymorphism)法によって解析したところ、2例において異常バンドが認められた。塩基配列解析の結果、1例では保存領域IIIとIVの間のコドン199に、他の1例では保存領域IVのコドン235にアミノ酸の変化を生じる点突然変異が見出された。これら変異が認められた部位はp53遺伝子の機能に関わる重要な部位であること、またこの2例においては正常p53遺伝子の発現が認められなかったことから、p53遺伝子の変異がネコの造血器腫瘍発生に重要な役割を果たしていることが考えられた。
造血器腫瘍におけるネコ白血病ウイルス(FeLV)の共通組み込み領域として見出したfit-1領域についてさらに解析を進めた。昨年度得られた600bpのプローブを用いて、ゲノミックライブラリーをスクリーニングし、fit-1領域を含む約25kbおDNAフラグメントを単離することができた。fit-1領域の3'側の部分をプローブに用いてノザンブロット解析を行ったところ、腫瘍細胞において1.4kbのRNAお発現が増強されていることが見出された。さらに、各種リンパ系腫瘍について解析したところ、新たに4例においてfit-1領域へのFeLVの組み込みが見出された。このように、本研究の結果、ネコのリンパ系腫瘍の発生と密接に関連し、既知の癌遺伝子とは異なるfit-1領域遺伝子を見出すことが出来た。

研究成果

• [文献書誌] Matsumoto,Momoi,Watari,Goitsuka,Tsujimoto,Hasegawa: "Detection of enhancer repeats in the long terminal repeats of feline leukemia viruses from cats with various neoplastic and non-neoplastic diseases." Virology. 189. 745-749 (1992)
• [文献書誌] Goitsuka,Ohno,Matsumoto,Hayashi,Momoi,Okamoto,Watari,Tsujimoto,Hasegawa: "Establishment and characterzation of a feline large granular lymphoma cell line expressing interleukin-2 receptor alpha-chain." J.Vet.Med.Sci.55. 863-865 (1993)
• [文献書誌] Momoi,Nagase,Okamoto,Okuda,Sasaki,Watari,Goitsuka,Tsujimoto,Hasegawa: "Rearrangements of immunoglobulin and T-cell receptor genes in canine lymphoma/leukemia cells." J.Vet.Med.Sci.55. 775-780 (1993)
• [文献書誌] Okuda,Umeda,Matsumoto,Momoi,Watari,Goitsuka,O'Brien,Tsujimoto,Hasegawa: "Molecular cloning and chromosomal mapping of feline p53 tumor suppressor gene." J.Vet.Med.Sci.55. 801-805 (1993)
• [文献書誌] Tsujimoto,Fulton,Nishigaki,Matsumoto,Hasegawa,Tsujimoto,Cevario,O'Brien,Onions,Neil: "A common proviral integration region,fit-1,in T-cell tumors induced by myc-containing feline leukemia viruses." Virology. 196. 845-848 (1993)
• [文献書誌] Uno,Momoi,Watari,Goitsuka,Tsujimoto,Shimada,Ono,Goto,Hasegawa: "Malignant histiocytosis with multiple skin lesions in a dog." J.Vet.Med.Sci.55. 1059-1061 (1993)