|
(1)WT1蛋白質の細胞周期制御における役割の解析
WT1cDNAをNIH3T3細胞にmicroinjectionすることにより、WT1がG1期に作用して細胞周期のS期への進行を抑制する機能をもつことを明らかにした。さらにCDK2/cyclinEあるいはCDK4/cyclinD1をWT1と同時に過剰発現するとWT1の効果が阻害されることを見いだした。WT1を過剰発現している細胞では、血清によるCDK2、CDK4、cyclinD1の発現誘導はおこるが、CDK2およびCDK4の活性亢進はおこらなかった。これらの結果から、WT1による細胞周期の制御機構にはCDK/cyclinの機能制御が重要であると考えられた。
(2)WT1蛋白質と細胞分化
WT1は白血病細胞やEC細胞の分化にともなって発現が低下することを見いだした。WT1を恒常的に発現させるとEC細胞はapoptosisをおこした。また、急性白血病ではWT1が異常発現しており予後と相関があること、WT1のPCRによる定量が残存白血病の検出に有用であることが明かとなった。
(3)WT1結合蛋白質の同定
酵母を用いたtwo-hybrid systemを用いてWT1結合蛋白質をコードする可能性のあるcDNAを2種類単離した。遺伝子産物についてWT1との結合能を検討したところin vitroでWT1と結合することが明かとなった。今後in vivoでのWT1結合能および機能について解析を進めて行く予定である。
|
