1992 年度実績報告書

ビブリオ層菌の産生するいわゆる溶血毒の病原的意義の解明

研究課題

研究課題/領域番号	04454196
研究機関	大阪大学
研究代表者	本田武司大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (60029808)
研究分担者	有田美知子大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (10127178) 余明順大阪大学, 微生物病研究所, 助手 (70093482) 山本耕一郎大阪大学, 微生物病研究所, 助教授 (30158274)
キーワード	腸炎ビブリオ / コレラ菌 / 耐熱性溶血毒 / エルトール型溶血毒 / Pore-forming toxin / 溶血毒
研究概要	腸炎ビブリオの主要な病原因子と考えられている耐熱性溶血毒(TDH及びTRH)及びコレラ菌の産生するエルトール型溶血毒を中心として、これらの構造と機能相関及び作用機序について解析を加えた結果、次にようなことが明らかになった。 1.変異毒素の作成と解析:既に作成できていた突然変異処理による変異毒素及び化学修飾による変異毒素に加え、TDHおよびTRH遺伝子間で融合遺伝子を多数作成し、その産物であるキメラ毒素の精製と解析を行った。その結果、N末から90番目のGly及び65番目のTrpの重要性が示された。さらに67番目、86番目、116番目のThr、Gly、Glyの活性への重要性も明らかになった。現在さらに耐熱性という特異な性状に必要な構造についても解析中である。 2.TDH/TRHは、溶血に先行しして赤血球膜のリン脂質に大きな変化を与えないことが明らかになった。 3.TDH/TRHは、溶血系でみる限りpore-forming toxinとして作用することが明らかになった。 4.コレラ菌の産生するエルトール溶血毒は、前駆体蛋白として産生され、自ら産生するHemagglutinin/Proteaseにより、分子量約15Kdのフラグメントが切断されることにより、活性化がおこることが明らかになった。このような結果をふまえ、現在TDH/TRH遺伝子を欠落させたisogenic変異株を作成中であり、これを用いてTDH/TRH病原性への関わりを明確にする予定である。また、溶血過程のうち初期段階の生化学的な機序を解析する実験が進行中であり、興味深い成績を得つつある。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Naka,A.et al.: "A simple purification method of Vibrio cholerae non-Ol hemagglutinin/protease by immunoaffinity columun chromatography using a monoclonal antibody" Microb.Immunol.36. 419-423 (1992)
[文献書誌] Yoh,M.et al.: "Comparison of Vibrio parahaemolyticus hemolysin(Vp-TRH)produced by environmental and clinical isolates" FEMS Microbiol・Letters. 92. 157-162 (1992)
[文献書誌] Yamamoto,K.et al: "Enzyme-labeled oligonucleotide probes for detection of the genes for thermostable direct hemolysin(TDH) and TDH-related hemolysin(TRH)of Vibrio parahaemolyticus" J.Clin.Microbiol.,. 38. 410-413 (1992)
[文献書誌] Honda,T.et al.: "The thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticus is a pore-forming toxin." Can.J.Microbiol.38. 1175-1180 (1992)
[文献書誌] Naka,A et al.: "Characterization of two forms of hemagglutinin/protea produced by Vibrio cholerae non-Ol." FEMS Microbiol.Letters. 98. 197-200 (1992)
[文献書誌] Honda,T.and T.Iida: "The pathogenicity of Vibrio parahaemolyticus and the role of the thermostable direct hemolysin and related hemolysins" Reviews in Medical Microbiology. 3.
[文献書誌] 本田武司: "今日の食中毒" 中央公論社,

1992 年度 実績報告書

ビブリオ層菌の産生するいわゆる溶血毒の病原的意義の解明

研究代表者

本田 武司 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (60029808)

研究成果

[文献書誌] Naka,A.et al.: "A simple purification method of Vibrio cholerae non-Ol hemagglutinin/protease by immunoaffinity columun chromatography using a monoclonal antibody" Microb.Immunol.36. 419-423 (1992)

[文献書誌] Yoh,M.et al.: "Comparison of Vibrio parahaemolyticus hemolysin(Vp-TRH)produced by environmental and clinical isolates" FEMS Microbiol・Letters. 92. 157-162 (1992)

[文献書誌] Yamamoto,K.et al: "Enzyme-labeled oligonucleotide probes for detection of the genes for thermostable direct hemolysin(TDH) and TDH-related hemolysin(TRH)of Vibrio parahaemolyticus" J.Clin.Microbiol.,. 38. 410-413 (1992)

[文献書誌] Honda,T.et al.: "The thermostable direct hemolysin of Vibrio parahaemolyticus is a pore-forming toxin." Can.J.Microbiol.38. 1175-1180 (1992)

[文献書誌] Naka,A et al.: "Characterization of two forms of hemagglutinin/protea produced by Vibrio cholerae non-Ol." FEMS Microbiol.Letters. 98. 197-200 (1992)

[文献書誌] Honda,T.and T.Iida: "The pathogenicity of Vibrio parahaemolyticus and the role of the thermostable direct hemolysin and related hemolysins" Reviews in Medical Microbiology. 3.

[文献書誌] 本田 武司: "今日の食中毒" 中央公論社,

1992 年度実績報告書

本田武司大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (60029808)

[文献書誌] 本田武司: "今日の食中毒" 中央公論社,