| 研究課題/領域番号 |
04454199
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| 研究種目 |
一般研究(B)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 研究分野 |
ウイルス学
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| 研究機関 | 富山医科薬科大学 |
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研究代表者 |
白木 公康 富山医科薬科大学, 医学部, 教授 (50135745)
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| 研究分担者 |
高原 照美 富山医科薬科大学, 医学部, 助手 (60240777)
落合 宏 富山医科薬科大学, 医学部, 助教授 (30018692)
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| 研究期間 (年度) |
1992 – 1993
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| キーワード | B型肝炎表面抗原(HBsAg) / 水痘ウイルス / O型糖鎖 / N型糖鎖 / Sialylation |
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| 研究概要 |
B型肝炎ウイルス表面(HBs)抗原遺伝子を、水痘ウイルスに組み込んだHBs抗原発現系を開発した。HBs抗原の合成、糖鎖の修飾過程、細胞外分泌過程を、糖鎖合成阻害剤、細胞内輸送阻害剤、および、糖鎖分解酵素処理などにより糖鎖合成過程を解析し、HBs抗原の細胞内局在を透過・免疫電子顕微鏡観察と対応させることによってHBs抗原の合成からHBs抗原粒子形成過程を明らかにした。ウイルスによって発現されたHBs抗原は、リボゾームで26Kの蛋白として合成されて、N-型糖鎖の修飾を受け30Kの糖蛋白となる。これらの2種の蛋白間で、ジスルフィド結合により26K-26K・26K-30K・30K-30Kの3種の二量体となる。HBs抗原は細胞内の空胞内腔まで輸送され、そこでHBs抗原粒子を形成する。空胞内のHBs抗原粒子はゴルジ顆粒に含まれる糖鎖修飾酵素によって、N型糖鎖は高マンノース型糖鎖から複合型糖鎖へと変換され、O型糖鎖が付加され、両糖鎖末端にシアル酸が付加される。これらの修飾によって、26K蛋白は30K蛋白に、30K蛋白は35K蛋白(30K-30K・30K-35K・35K-35K)となる。このように空胞内で成熟したHBs抗原粒子は、exocytosisにより細胞外へ分泌される。このようにHBs抗原の合成から分泌までの過程が明らかにできた。
このHBs抗原に特徴的なことは、N型とO型糖鎖の修飾を受けており、他のいずれの発現系においても、O型糖鎖による修飾は認められず、O型糖鎖はこの系に特異的であることが明らかとなった。また、このHBs抗原の発現系を用いて、慢性肝炎の治療に使用されているグリチルリチンが、トランスGolgi領域でHBs抗原のシアル酸付加を特異的に阻害する事を明らかにした。
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