1992 年度実績報告書

高親和性IgEレセプター(Fсε RI)を介したシグナル伝達機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号	04454212
研究機関	順天堂大学
研究代表者	羅智靖順天堂大学, 医学部, 講師 (60230851)
研究分担者	廣瀬智弘山之内製薬, 中央研究所, 研究員
キーワード	FсεRI / シグナル伝達 / マスト細胞 / キメラ融合分子 / I型アレルギー / アトピー遺伝子
研究概要	高親和性IgEレセプター(Fсε RI)は、マスト細胞、好塩基球に特異的に発現しているレセプターで、IgEによって媒介されるI型アレルギー反応の効果相を発動させる分子である。Fсε RIはα_1β_1γ_2の四量体構造をとっており、α鎖はIgEを結合し、β、γ鎖はシグナル伝達に関与する。先ずシグナル受容の分子機構を明らかにする目的で、高親和性IgE結合を担う部位の探求を開始した。遺伝子組み換えによってヒトFсε RIα鎖細胞外ドメインの可溶化に成功し、このα鎖細胞外ドメインはそれ単独で、細胞表面に発現している完全型のレセプターと同じ高親和性をもってIgEを結合すること、そしてそのstoichiometryは1:1であることを明らかにした。さらにIgE結合部位の同定のための立体構造解析を目的としたα鎖の結晶化に向けて、可溶化α鎖の大量生産システムを開発しつつある。一方シグナル伝達に関与するヒトβ鎖の遺伝子単離を行い、オックスフォード大学との共同研究でこのβ鎖遺伝子がアトピー遺伝子と連鎖していることを明らかにした。より単純な一分子の系を用いてシグナル伝達を解析するために、IgEを結合するヒトα鎖細胞外ドメインと、シグナル伝達に関与するヒトβ鎖s末端側に細胞内ドメインまたはヒトγ鎖の細胞内ドメインとのキメラ融合分子をコードするcDNAをPCRにて合成し、種々の細胞株に導入した。宿主の細胞株の性質に応じて、導入キメラ融合分子の細胞膜への発現様式を検討し、発現のためのaccessory moleculeの要求性とその会合様式を解析するとともに、キメラ融合分子を発現したいくつかの細胞株を樹立し、現在この分子を介したシグナル伝達機構の解析を始めている。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Ra,C.,Kuromitsu,S.,Hirose,T.,Yasuda,S.,Furuichi,K.,Okumura,K.: "Soluble human high-affinity receptor for IgE abrogates the IgE-mediated allergic reaction." Int.Immunol.5. 47-54 (1993)
[文献書誌] Sandford,A,.Shirakawa,T.,Moffat,M.,Daniels,S.,Ra,C., et al.: "Localisation of atopy and the β subunit of high affinity IgE receptor (FсεRI) on chromosome 11q." The Lancet. 341. 332-334 (1993)
[文献書誌] Blank,U.,Ra,C.,Kinet,J.P.: "Characterization of truncated α chain products from human,rat and mouse high affinity receptor for immunoglobulin E." J.Biol.Chem.266. 2639-2646 (1991)
[文献書誌] Orloff,D.,Ra,C.,Frank,S.,Klausner,R.,Kinet,J.P.: "Family of disulphide-linked dimers containing the ζ and η chains of the T cell receptor and the γ chain of Fс receptors." Nature(London). 347. 189-191 (1990)
[文献書誌] Ra,C.,Jouvin MH,Blank,U.,Kinet J.P.: "A macrophage Fсγ receptor and the mast cell receptor for IgE share an identical subunit." Nature(London). 341. 752-754 (1989)
[文献書誌] Blank,Y.,Ra,C.,Miller,L.,White,K.,Metzler,H.,Kinet J.P.: "Complete structure and expression in transfected cells of high affinity IgE receptor." Nature(London). 337. 187-189 (1989)
[文献書誌] 羅智靖: "マスト細胞の最前線" 医科学出版社,
[文献書誌] 羅智靖: "免疫のしくみと疾患" 羊土社, 166 (1993)

1992 年度 実績報告書

高親和性IgEレセプター(Fсε RI)を介したシグナル伝達機構の解析

研究代表者

羅 智靖 順天堂大学, 医学部, 講師 (60230851)

研究成果

[文献書誌] Ra,C.,Kuromitsu,S.,Hirose,T.,Yasuda,S.,Furuichi,K.,Okumura,K.: "Soluble human high-affinity receptor for IgE abrogates the IgE-mediated allergic reaction." Int.Immunol.5. 47-54 (1993)

[文献書誌] Sandford,A,.Shirakawa,T.,Moffat,M.,Daniels,S.,Ra,C., et al.: "Localisation of atopy and the β subunit of high affinity IgE receptor (FсεRI) on chromosome 11q." The Lancet. 341. 332-334 (1993)

[文献書誌] Blank,U.,Ra,C.,Kinet,J.P.: "Characterization of truncated α chain products from human,rat and mouse high affinity receptor for immunoglobulin E." J.Biol.Chem.266. 2639-2646 (1991)

[文献書誌] Orloff,D.,Ra,C.,Frank,S.,Klausner,R.,Kinet,J.P.: "Family of disulphide-linked dimers containing the ζ and η chains of the T cell receptor and the γ chain of Fс receptors." Nature(London). 347. 189-191 (1990)

[文献書誌] Ra,C.,Jouvin MH,Blank,U.,Kinet J.P.: "A macrophage Fсγ receptor and the mast cell receptor for IgE share an identical subunit." Nature(London). 341. 752-754 (1989)

[文献書誌] Blank,Y.,Ra,C.,Miller,L.,White,K.,Metzler,H.,Kinet J.P.: "Complete structure and expression in transfected cells of high affinity IgE receptor." Nature(London). 337. 187-189 (1989)

[文献書誌] 羅 智靖: "マスト細胞の最前線" 医科学出版社,

[文献書誌] 羅 智靖: "免疫のしくみと疾患" 羊土社, 166 (1993)

1992 年度実績報告書

羅智靖順天堂大学, 医学部, 講師 (60230851)

[文献書誌] 羅智靖: "マスト細胞の最前線" 医科学出版社,

[文献書誌] 羅智靖: "免疫のしくみと疾患" 羊土社, 166 (1993)