PCR法を用いたメッセンジャーRNA定量による心筋症の病態の解明 ー基礎的および臨床的研究ー

1992 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 04454263
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 松森 昭 京都大学, 医学部, 講師 (70135573)
• キーワード: メッセンジャーRNA / ポリメラーゼ連鎖反応 / 心筋症 / 心筋炎 / スーパーオキシドジスムターゼ / フリーラジカル / カプトプリル / メルカプトグリシン

研究概要

本年度は研究者の開発したウイルスによる心筋症動物モデルにおける基礎的研究を行った。
DNAデータバンクの検索により、スーパーオキシドジズムターゼ(SOD)レニン・アンジオテンシン系の各因子(レニン、アンジオテンシノーゲン、アンジオテンシン変換酵素、アンジオテンシンIIレセプター)、α-チューブリンにつきヒト、マウスにおけるDNA配列を確認し、それに対するプライマーをDNAシンセサイザーを用いて合成した。
ウイルス性心筋炎モデルにおける検討: 4週令のBald/cマウスにEMCウイルスを接種し心筋炎を作製し、接種1-14日後に心臓を摘出し、RNAを抽出した。PCR法により作製したMn-SOD、CU/Zn-SODのプローブを^<32>Pで標識し、ノザンブッロトを行った。Mn-SOD、Cu/Zn-SODのmRNA発現量は、3日後から増加、5日後に最大であった。フリーラジカル消去剤であるN,2-メルカプトプロピオニルグリシン(MPG)投与によりSODの発現が抑制され、心筋傷害が軽減した。さらに、SH基を有するアンジオテンシン変換酵素阻害薬カプトリルも同様の効果をもつことが明かとなり、ウイルス性心筋炎における心筋傷害にフリーラジカルが関与していることが示唆された。
このようにmRNAの定量的評価は心筋症の病態の解明に有用であることが明かとなったが、次年度はレニン・アンジオテンシン系について検討するとともに、ヒト心筋炎・心筋症の心内膜心筋生検標本について検討する予定である。

研究成果

• [文献書誌] Hosono M: "Human/mouse chimeric antibodies show low reactivity with human anti-murine antibodies(HAMA)." Br J Cancer. 65. 197-200 (1992)
• [文献書誌] Matsumori A: "Lessons from animal experiments in myocarditis." Herz. 17. 107-111 (1992)
• [文献書誌] Okada I: "Successive infection of coxsackievirus B3 and encephalomyocarditis virus:An animal model of chronic myocarditis." J Pathol. 167. 341-347 (1992)
• [文献書誌] Sato Y: "Effect of immunostimulant therapy on acute viral myocarditis in an animal model." Am Heart J. 124. 428-434 (1992)
• [文献書誌] Yamada T: "The effect α_1-blocker,bunazosin on a murine model of congestive heart failure induced by viral myocarditis." Jpn Circ J. 56. 1138-1145 (1992)
• [文献書誌] Okada I: "Combination treatment with ribavirin and interferon for experimental coxsackievirus B3 replication." J Lab Clin Med. 120. 569-573 (1992)
• [文献書誌] Okada I: "Detection of viral RNA in experimental coxsackievirus B3 myocarditis of mice using the polymerase chain reaction." Int J Exp Pathol. 73. 721-731 (1992)
• [文献書誌] Kyu B: "Cardiac persistence of cardioviral RNA detected by polymerase chain reaction in a murine model of dilated cardiomyopathy." Circulation. 86. 522-530 (1992)
• [文献書誌] Sato Y: "Treatment of coxsackievirus B3 myocarditis by immunoactive peptide in an animal model." Clin Immunol Immunopathol. 65. 65-69 (1992)
• [文献書誌] Yamada T: "Time-course of myocardial infarction evaluated by indium-111 antimyosin monoclonal antibody scintigraphy: Clinical implications and prognostic value." J Nucl Med. 33. 1501-1508 (1992)
• [文献書誌] Tominaga M: "Activation of Ca-permeable cation channels by myocarditis-associated antibody in guinea pig ventricular myocytes." J Clin Invest.
• [文献書誌] Suzuki H: "Enhanced expression of superoxide dismutase messenger RNA in viral myocarditis:An SH dependent reduction of its expression and myocardial injury." J Clin Invest.
• [文献書誌] Matsumori A: "A questionnaire study β-adrenergic blockade in dilated cardiomyopathy in Japan." Jpn Circ J. 56. 767-775 (1992)
• [文献書誌] Anan R: "Cardiomyopathy update 6.Molecular genetic analyses of familial hypertrophic cardiomyopathy." University of Tokyo Press,
• [文献書誌] Matsumorl A: "In Viral infections of the heart.Experimental studies." Edward Arnold,Kent England,
• [文献書誌] Matsumori A: "Mechanism and significance of myocardial uptake of antimyosin antibody in myocarditis and cardlomyopathy: Clinical and experimental studies." Springer-Verlag,
• [文献書誌] Matsumori A: "International Symposium on ldiopathic Dilated Cardiomyopathy.Animal models for therapeutic trials of viral myocarditis." Springer-Verlag,